一种新型鲑鱼降钙素类似物及其在植物油体中表达的方法

摘要

本发明采用基因工程技术，克隆了一种新型鲑鱼降钙素类似物的基因msCT(31 aa)，并建立了油体蛋白(oleosin)与目的蛋白融合的基因表达体系。其中包括：(1)分离和克隆了油菜油体蛋白基因的启动子及编码芝麻油体蛋白的结构基因；(2)设计合成了编码鲑鱼降钙素类似物msCT[Trp¹，Ser⁶，Phe⁷，del－Leu¹⁹]的基因msCT，将其插在芝麻油体蛋白基因的C端；(3)构建了由油菜油体蛋白基因启动子驱动的芝麻油体蛋白－msCT融合基因植物表达载体，分别用农杆菌法和花粉管通道法转化油菜和棉花，分别获得转基因植株及株系。(4)转基因油菜和棉花的分子生物学检测证明外源基因的整合和表达。本发明的新型降钙素类似物，其生物活性为6000～8000U/mg，远远超过天然鲑鱼降钙素4,500U/mg和人降钙素150U/mg，该鲑鱼降钙素类似物具有降低血钙的作用，可用于治疗骨质疏松、Paget′s症、骨痛及各种高血钙症等。

主权项

1.一种编码鲑鱼降钙素类似物msCT(31aa)的基因msCT[Trp1，Ser6，Phe7，del-Leu19]，其编码产物的氨基酸序列结构为：Trp-Ser-Asn-Leu-Ser-Ser-Phe-Val-Leu-Gly-Lys-Leu-Ser-Gln-Glu-Leu-His-Lys-Gln-Thr-Tyr-Pro-Arg-Thr-Asn-Thr-Gly-Ser-Gly-Thr-Pro-NH2，即将天然鲑鱼降钙素的第1位氨基酸Cys突变为Trp，第6位的Thr突变为Ser，第7位的Cys突变为Phe，第19位的Leu缺失。