Method for the amplification by reverse transcription coupled to a nested or semi-nested reaction PCR in a single step, of a target RNA, and its applications in the identification of enterovirus and the discrimination between poliovirus and non-polio enterovirus.

摘要

Método para la amplificación mediante transcripción en reverso acoplada a una reacción de nested o semi-nested PCR en un solo paso, de un ARN diana, y sus aplicaciones en la identificación de enterovirus y en la discriminación entre poliovirus y enterovirus no-polio. El método comprende efectuar la transcripción en reverso de un ARN diana contenido en una muestra mediante el empleo de una enzima con actividad apropiada y aplicar un tratamiento térmico para desnaturalizar el ARN diana y un ciclo térmico de baja temperatura. A partir del ADNc obtenido se puede amplificar un fragmento por nested o semi-nested PCR. El método tiene utilidad en la amplificación de ARN y en la detección e identificación de entidades macromoleculares que comprenden ARN, por ejemplo, en la identificación de enterovirus y en la discriminación de poliovirus y enterovirus no-polio.