一种肝素及其制备方法

摘要

本发明为一种肝素及其制备方法，肝素的提取起始原料为肠粘膜，通过酶水解或者盐水解得到含有肝素的溶液，再通过聚苯乙烯二乙烯苯三甲胺季胺型强碱性阴离子交换树脂吸附，洗涤，洗脱出肝素类粘多糖物质，本发明特征是此物质经过精制、纯化操作最终得到精品肝素，采用有机溶媒的分级沉淀，从中分离出类肝素类其他粘多糖，如硫酸皮肤素等物质，再经过二次过氧化氢氧化的精制操作。使最终精品肝素质量达到单位效价高，无菌、无热原、无杂质，透光率、收得率均达到国际国内领先水平，且操作简便，适合于规模生产。

主权项

1、一种肝素制备方法，肝素提取大多数可从牛肺；哺乳动物的肝脏， 胸腺和牛、羊、猪的肠粘膜中提取，通过酶水解，或者盐水解，用强碱性 阴离子交换树脂分离后得到肝素粗品，酶解生产肝素粗品按以下次序工艺 流程进行： 肠粘膜在pH8.5-9.0条件下加入胰酶和氯化钠升温至40℃-50℃，保温 2-3小时后升温到90℃，用6N氢氧化钠调pH6.5，布袋过滤得清液，加入 3-5％(重量)的D254树脂搅拌吸附5小时，树脂经过洗涤后，洗脱出含 肝素的粗品液用1∶0.9倍(体积)量95％乙醇沉淀后，真空干燥得粗品肝素； 盐解生产肝素粗品按以下次序工艺流程进行：肠粘膜加入3.3％(重量)食 用盐、氢氧化钠调pH8.8-9.0逐步升温至50-55℃，保温2小时，继续升温 至95℃，维持10分钟冷却至60℃，以下用30目双层纱布过滤，收集滤液， 再加入3-5％(重量)的D254树脂搅拌吸附6小时，弃除废液，树脂用水 漂洗后，经过洗涤、洗脱，得含肝素液体，加入1倍(体积)量95％乙醇 沉淀过夜，虹吸上清液，抽滤或布袋吊滤干后，加95％乙醇洗2-3次，进 60℃-80℃真空干燥箱内干燥得肝素粗品，粗品肝素再进行精制和纯化，其 特征在于： 精制纯化经过二次过氧化氢的氧化及有机溶媒的分级沉淀，其精制的 工艺流程为：粗品溶解于10-15倍(体积)量1％盐水中加入6N盐酸调 pH1.0-2.0使肝素酸化，在5℃-10℃条件下过滤出清液，调pH9.0-11.0加 入0.5-1.5％H₂O₂升温25℃并保温24小时后，用0.2μm的微孔滤膜过滤后， 0.8倍(体积)量95％酒精沉淀6小时后，虹吸出上清液，沉淀物用1％氯化 钠盐水溶解后再调pH9.0-11.0再加入1.5％H₂O₂升温25℃，并保温24小时 后，用0.2μm的微孔滤膜过滤后，0.7倍(体积)量95％酒精沉淀6小时 后，虹吸出上清液，沉淀溶解于粗品重量6-10倍的1％无热原氯化钠溶液中 溶解，冷至10℃以下，用0.2μm微孔滤膜再将液体滤至澄清，清液加入 0.65～0.7倍(体积)量95％酒精沉淀静置过夜，次日吸出上清液，沉淀滤 干后，95％乙醇洗涤1-2次后进60℃-80℃真空干燥箱，干燥24-36小时后， 球磨后得精品肝素。