松材线虫病的早期诊断检测方法

摘要

涉及一种松材线虫病的检测方法，在固体或液体霉菌培养基上接种盘多毛(株号：Ps0202)或其它微生物真菌，在待测的松树树干上凿出或钻出圆孔，然后将装有菌体的试管插入树干上的圆孔，3～5天取出试管用显微镜观察、鉴定。用这种方法检测松材线虫病，既可实现早期诊断，又可使松树免于削皮之患，达到保护松林景观的目的。因为松树萎蔫病发病初期，其病原－松材线虫数量很少，本方法能把线虫诱入管子内，在其培养的真菌上虫量迅速扩增，从而提高检测的灵敏度，同时便于操作，有利于大规模检测及松树线虫病早期普查。

主权项

1、松材线虫病的早期诊断方法，其特征在于所用的微生物真菌盘多毛：(Pestalotia sp.)，株号：Ps0202，其步骤如下：步骤一：配制霉菌培养基，适于的有马铃薯汁培养基(PDA)，草浸汁培养基、玉米粉培养基(CMA)、察培克培养基、淘米水培养基或糖蜜培养基，培养基为固体或液体；步骤二：将配制好的固定霉菌培养基分装入小口径的试管内，装量为管子容量的1/3～1/2，用锡铂纸封口，经高压灭菌后倾倒成平面，冷却凝固后接种微生物真菌，20～28(℃培养3～5天，5～10℃冷藏备用；或将配制好的液体培养基装入容器内，高压灭菌，冷却后接种微生物真菌，20～28℃培养3～5天后分装小口径试管，每支装量2～3ml，用锡铂纸封口，竖放备用；所说的微生物菌为盘多毛(Pestalotia sp.)、灰葡萄孢(Botrytis cinerea Pers.)、加拿大盘革菌(Aleurodiscus canadensis skolko)、松壳囊孢(Cytospora pini Desm.)或克拉夫特杰夫干酪菌(Tyromyces kravtzevianus Bondarzew&Parmasto in Parmasto)；步骤三：在被测的松树树干上凿出或钻出直径与试管相同、深度为试管长度1/3的圆孔。揭去试管口的锡铂纸，塞入棉花，并滴加2～5ml灭菌水，然后将试管插入圆孔中；步骤四：3～5天后取出试管，解剖镜下观察、鉴定。