一种生产抗癌药物工程菌的发酵方法

摘要

本发明是一种生产抗癌药物工程菌即DH5a－pBVnm23－H1的发酵方法研究。该法包括如下步骤：发酵培养基配方筛选和发酵工艺条件选定。配方包括酵母提取物、蛋白胨、葡萄糖等组成，发酵工艺包括菌种的加入量及其最佳生长时期，工程菌生长和诱导表达的时间及温度、加糖时刻及方式选择，发酵液酸碱度的调节等。用本发明培养基配方及所建立的发酵工艺进行DH5a－pBVnm23－H1的发酵，具有菌体得率高、目标蛋白表达量高、时间短、成本低等特点。

主权项

1、一种生产抗癌药物工程菌的发酵方法，其特征是：A.按配制10L发酵液，发酵培养基配方重量百分比如下： 酵母提取物(Yeast extract) 0.30～3.0 蛋白胨(Typtone) 0.30～3.0 氯化钠(NaCl) 0.50～1.5 葡萄糖(Glucose) 0.30～5.0 微量元素 适量B.发酵工艺(1)菌种的加入量菌种的接种量为培养基溶液的5～15％，菌种的光密度为1～3；(2)工程菌生长和诱导表达的时间及温度工程菌发酵过程中，长菌温度为28～35℃，时间2～5小时，诱导表达的温度为39～45℃，时间3～7小时；(3)加糖时刻及方式选择加糖方式采取慢速加糖方式，加糖量为100～350g，且在0.5～3小时加完；(4)发酵液酸碱度调节采用酸碱自动平衡调节pH值，使pH值维持在6.5～7.5之间；(5)溶氧水平通过通气量与转速自动调节溶氧，维持在40％以上水平。