发明名称 包涵体蛋白复性并同时纯化的方法
摘要 本发明涉及的包涵体蛋白复性并同时纯化的方法,为将溶解的包涵体蛋白在离子交换层析柱中进行变性剂浓度的梯度洗脱或pH值梯度洗脱或同时进行变性剂浓度梯度洗脱和pH值梯度洗脱;其具体步骤是:1)用酸性/碱性流动相I或者其它溶液溶解的包涵体蛋白,进入到流动相I平衡的离子交换层析柱中,包涵体蛋白可逆地被吸附在层析介质上;2)然后用碱性/酸性流动相II梯度取代流动相I进行梯度长度为1-5柱体积,流动相II中的变性剂的浓度低于流动相I中的变性剂的浓度,其蛋白可获得高浓度下的高活性回收,同时此过程对不纯的包涵体蛋白有纯化作用。
申请公布号 CN1410435A 申请公布日期 2003.04.16
申请号 CN01141501.0 申请日期 2001.09.27
申请人 中国科学院过程工程研究所 发明人 苏志国;李明
分类号 C07K1/18 主分类号 C07K1/18
代理机构 上海智信专利代理有限公司 代理人 高存秀
主权项 1.一种包涵体蛋白复性并同时纯化的方法,其特征在于,该方法为将溶解的包涵体蛋白在离子交换层析柱中进行变性剂浓度的梯度洗脱或pH值的梯度洗脱或同时进行变性剂的浓度梯度洗脱及pH值的梯度洗脱;其具体步骤是:1)酸性/碱性流动相I或者其它溶液溶解的包涵体蛋白进经流动相I平衡后的离子交换层析柱,包涵体蛋白可逆地被吸附在层析介质上;2)然后用碱性/酸性流动相II梯度取代流动相I对包涵体蛋白溶液进行梯度洗脱,洗脱梯度长度为1-5个的柱体积,流动相II中的变性剂的浓度低于流动相I中的变性剂的浓度。
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