原核细胞体内抗体文库构建、抗体的筛选和优化及用途

摘要

本发明涉及在原核细胞即大肠杆菌体内构建多种属、高滴度、高丰度、高多样性的抗体文库、高特异性、高亲和力抗体的筛选和优化及用途。解决了噬菌体展示技术体外构建抗体文库不能反映实际抗原抗体反应的缺陷，利用在原核细胞即大肠杆菌增殖表达并能用于大肠杆菌双杂交的特殊重组质粒中构建高滴度、高丰度、高多样性抗体和抗体片段文库和次级抗体文库。在筛选抗体前，不需要纯化抗原，仅需要含有抗原表位的基因DNA顺序，并将抗原基因的全部或部分开放阅读框架(open reading frame，ORF)可操作地与特殊蛋白编码基因形成融合基因，从而进行高特异性、高亲和力抗体的筛选和优化。本发明的用途是所获得抗体和抗体片段可作为药物用于临床疾病诊断、治疗，也可以用于生命科学研究及抗体工程和基因工程生产和改造。

主权项

1.原核细胞体内抗体文库构建及抗体的筛选方法，包括原核细胞体内抗体，其特征在于在原核细胞体内构建多种属、高滴度、高丰度、高多样性抗体和抗体片段文库，筛选高特异性抗体。