一种海洋细菌胞外多糖的生产工艺

摘要

涉及一种利用微生物发酵制备的多糖，生产工艺步骤为分离获得土壤杆菌1202菌株；制作种子培养液；发酵；提取，即得多糖产品。由于筛选了先进的配方与工艺，因此所获得的1202多糖具有良好的增强机体的免疫功能，可作为单一有效活性组分用于制备增强免疫剂药物等。产量高、成本低，含多糖在92％以上。

主权项

1、一种海洋细菌胞外多糖的生产工艺，其特征在于所涉及的微生物为土壤杆菌1202 菌株(Agrobacteriumsp.1202)，保藏单位简称为CCTCC，保藏编号为CCTCC NO.M200019；海洋细菌胞外多糖的生产工艺步骤为1)分离获得生产菌株-土壤杆菌1202 菌株；2)制作种子培养液：将菌株斜面接种于牛肉膏蛋白胨液体培养基中，pH：6.8～7.4， 在温度24～28℃、搅拌速度180rpm、通风比1∶1培养48～72小时，获种子培养液；3) 发酵生产：种子培养液以5％～10％(V/V)的接种量接种于多糖发酵培养基中，培养基组 成中各成分的重量比为：蔗糖60～120g，酵母膏2.0～4.5g，玉米浆5～25g，CaCO₃1.0～ 2.5g，KH₂PO₄0.5～1.0g，MgSO₄0.5～1.0g，FeSO₄0.08～0.15g，NaCl1.0～3.0g，pH7.0～7.4， 自来水定容至1000mL，在温度24～28℃、搅拌速度240rpm、通风比1∶0.3～0.5发酵5～ 7天；4)提取：将发酵液经离心去除菌体，上清液用2～3倍(V/V)的乙醇沉淀，沉淀物 调节成0.2％～0.4％(V/V)的多糖水溶液，以多糖液∶氯仿∶正丁醇＝30∶10∶1(V/V) 沉淀去除蛋白，离心获得上清液，用2～3倍(V/V)乙醇沉淀，沉淀物经等量的70％乙醇 洗涤2遍，在65～70℃烘干，再粉碎后得多糖产品。