酵母重组株及IFNα－2b干扰素的纯化方法

摘要

本发明涉及分泌表达α－2b干扰素的酵母工程菌株IFNα－2b/pGAPZα－A/GS115构建的关键技术、构建结果及利用它来生产α－2b干扰素的纯化方法。本发明采用酵母分泌表达系统取代大肠杆菌包涵体表达系统，目标蛋白α－2b干扰素不需要复性，其生物比活性可达到1.0×10⁹单位/毫克蛋白，低毒副作用；在纯化过程中，不需要价值昂贵的单抗柱，即可从发酵液中提取获得纯度达95％以上的目标蛋白α－2b干扰素，降低了生产成本。

主权项

1.一种酵母重组株，其特征在于将克隆修饰的α-2b干扰素基因插入pGAPZα-A之GAP启动子/α-factor信号肽下游位点，删除Kex2(Lys-Arg)位点之后的Ste13位点(Glu-Ala-Glu-Ala)和启始密码子ATG，构建成α-2b干扰素基因分泌型表达载体IFNα-2b/pGAPZα-A，转入毕赤氏酵母(Pichia pastoris)的菌株GS115，构建成分泌型α-2b干扰素重组酵母工程菌株IFNα-2b/pGAPZα-A/GS115。