商陆抗病毒蛋白的生产工艺

摘要

本发明在充分了解PAP的理化性质的基础上，克服了原实验室工艺中的硫酸铵沉淀法不利于大规模生产、工艺复杂、耗时等缺陷，改用本生产工艺提取PAP：商陆叶抽提→酸处理→热处理→用Mono Q或Mono S进行快速液相层析，使工艺路线得以简化，高效省时，产品的纯度及回收率均得到大幅提高。

主权项

1.一种商陆抗病毒蛋白的生产工艺，其特征在于对商陆叶进行抽提、酸处理、热处理和FPLC，得到高纯度的PAP产品，具体步骤为：(一)抽提商陆叶加3～5倍体积的缓冲液TEB pH7.5+(0.1～0.2)mol/L NaCl匀浆，在4℃(冷柜)下搅拌抽提，冷置，过滤，于30000～45000g离心20～40分钟，滤液下步备用；(二)酸处理加入醋酸，调节pH值至4.0，在4℃下保持20～40分钟，于30000～45000g离心20～40分钟，滤液下步备用；(三)热处理将滤液加热至60～70℃，处理10～20分钟，经冰浴，迅速冷却，于30000～45000g离心20～40分钟，滤液下步备用；(四)FPLC柱：Mono S HR5/5或Mono Q HR5/5，流速0.8～1.5毫升/分钟，缓冲液：(A)TEB pH8.0+(0.2～0.75)mol/L NaCl，(B)TEB pH8.0+(0.8～1.0)mol/L NaCl，进行梯度洗脱。