点突变基因的检测方法及装置

摘要

本发明提供一种点突变基因的检测方法，利用待测序列的突变位点发生突变后恰巧能形成一个限制性内切酶酶切位点，用该内切酶可切去标记在突变型样品上的电化学发光底物而导致检测不到电化学发光信号；野生型样品由于不存在酶切位点，因此酶切前后检测到的电化学发光信号基本一致；通过比较样品酶切前后电化学发光信号强度的变化来区分点突变是否发生；一种点突变基因检测装置包括如下组件：样品池、恒电位仪、光纤、光电倍增管、模数转换器、微型计算机和数据处理软件；本发明具有灵敏、快速、准确、操作简便等优点。

主权项

1、一种点突变基因的检测方法，其特征在于包括以下步骤：(1)用一段标记生物素的3’端引物和一段标记三联吡啶钌复合物的5’端引物扩增一段包含一个突变位点的待测序列，点突变发生后，恰巧能在该突变位点处形成一个限制性内切酶酶切位点；(2)扩增后，样品被分成两等份，一份用该种限制性内切酶酶切，只有当点突变发生后，限制性内切酶才能将标记三联吡啶钌复合物的5’端从标记生物素的3’端切去；另一份保持不变；(3)生物素标记的DNA序列通过与链霉亲和素包被的磁珠连接而被收集到样品池中，其它成分则被洗去；(4)通过检测由样品池中的三联吡啶钌复合物产生的电化学发光信号确定两份样品中与生物素标记的DNA连接的三联吡啶钌复合物的量；(5)通过比较样品酶切前后电化学发光信号强度的变化来区分点突变是否发生。