一种培养雨生红球藻生产虾青素的方法

摘要

本发明公开了一种培养雨生红球藻生产虾青素的方法，包括培养基配方、一步法生产工艺、培养基的循环使用和用二氧化碳调节培养液pH值诱导红球藻孢子的形成和虾青素积累的方法。雨生红球藻的营养细胞的生长、孢子转化和虾青素累积是在同一个光生物反应器、同一培养基中完成，通过调控培养液的pH值促进孢子转化和虾青素累积，培养周期为12－15天。培养基经过回收—处理—重新配制，可以循环使用至少6次。减少生产过程的废水排放，保护环境；本发明工艺简便，生产周期短，12－15天内完成营养生长、孢子转化和虾青素积累，产量高，质量好。

主权项

1、一种培养雨生红球藻生产虾青素的方法，包括下列步骤：A、配制培养基：硝酸钾 0.4-0.7g/L磷酸氢二钾 0.08-0.12g/L硫酸镁 0.08-0.12g/L硫酸钙 0.04-0.06g/L三氯化铁 2.38-2.50×10-4g/L乙二胺四乙酸二钠 1.85-3.7×10-4g/L氯化锌 3.7-5.0×10-6g/L硼酸 5.5-8.0×10-5g/L氯化钴 4.8-9.6×10-6g/L硫酸铜 6.4-8.5×10-6g/L氯化锰 3.8-7.6×10-6g/L钼酸铵 3.0-5.0×10-5g/L维生素B12 1.0-3.0×10-6g/L生物素 1.0-3.0×10-6g/LB、接种：将红球藻绿色游动细胞接种到配置好的培养基中，使细胞密度达到5×104cells/ml；C、培养：培养过程光照采用自然光，利用机械搅拌使培养液保持均匀的流动，温度调控在15-28℃范围内，在培养的前6天，通过向培养液中通二氧化碳，将培养液的pH值调节在7-8.5；D、诱导虾青素的积累：从培养的第7天开始，控制通入二氧化碳的频率和数量将培养液的pH值调节在8.5-10.0，在这一阶段内，红球藻游动细胞逐渐转化为孢子，虾青素积累；E、采收红球藻：培养进行到第12天，培养液中95％的细胞转化为孢子，孢子内充满了红色的虾青素，藻液呈深红色，即可采收，将藻液静置，红球藻孢子沉淀下来，收集上清液备用，孢子在低于100℃的温度下干燥；F、培养基的重新配制：收集的上清液首先经过活性碳处理、过滤，得到澄清的液体，再向其中加入各种营养成分配制成新的培养基，以备下一次培养使用；G、培养基的循环使用。