棉铃虫颗粒体病毒增效蛋白应用

摘要

本发明公开了利用基因工程生产的棉铃虫颗粒体病毒(HaGV)增效蛋白作为有效成分,提高病毒杀虫剂、BT杀虫剂、阿维菌素等生物杀虫剂或利用生物杀虫剂制备的复合生物杀虫剂,或单独用于转基因抗虫植物的防治虫害方法。

主权项

1.利用工程菌株Escherichia coli M15(pEHa)生产棉铃虫颗粒体病毒(HaGV)增效蛋白PHEn的方法。其特征在于：将工程菌株Escherichia coli M15(pEHa)单菌落挑到内含100μg/ml的氨苄青霉素和25μlg/m卡那霉素的LB培养基中，37℃，200rpm过夜培养，以1∶20比例接种到含上述双抗的500mlLB培养基中继续培养，当其溶液达到OD600＝0.3时，加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷至终浓渡1mM，37℃，200rpm诱导表达5h，收获菌液，4000rpm离心10min，收获菌体沉淀，再经提取、纯化获得HaGV增效蛋白晶体(PHEn)。