玉米自交系花粉管通道转基因改良技术

摘要

玉米自交系花粉管通道转基因改良技术。外源目的基因的导入在玉米自交后6～8小时内进行,将雌穗花丝全部剪去,在切口处滴注100～300微升外源目的基因DNA液,重新套上纸袋,做好记载。将收获的种子灭菌后置于培养基上发芽生长,对幼苗进行多聚酶链式反应检测和分子杂交分析,再对转化后代进行自交纯化和农艺性状鉴定,培养出转基因玉米自交系。本发明提供了一种简便、经济、有效的玉米自交系转基因改良方法,适用于各种基因型的转化,具有转化效率高、改良时间短等优点。

主权项

1、玉米自交系花粉管通道转基因改良技术，采用常规技术获得外源目的基因的质粒DNA，检测纯度和质粒大小，然后放入-20℃冰箱内保存，其特征在于外源目的基因的导入在玉米自交后6～24小时内进行，将雌穗上的纸袋摘下，用剪刀将雌穗花丝靠近穗顶部全部剪去，留下平齐的切面，然后用针式微量进样器在切口处滴注100～300微升纯化好的外源目的基因DNA液，立即重新套上纸袋，做好记载，标明导入的时间和用量；根据目的基因所携带的选择标志抗性基因，配制选择培养基，将收获的种子灭菌后置于培养基上发芽生长，选择生长发育正常的幼苗进行多聚酶链式反应检测，对多聚酶链式反应检测呈阳性植株，进行分子杂交分析和目标性状鉴定，再对转化后代进行自交纯化和农艺性状鉴定，培养出转基因玉米自交系。