| 摘要 |
本发明是一种分子生物学技术,即一种改进的体外酶促合成特异DNA片段的聚合酶链式反应方法PCR,其特点是突破了现有PCR对引物长度设计的普遍认知和人为限制,以一对长度为31－50碱基的超长引物替代现有长度碱基引物,其PCR循环步骤亦随之简化为高温变性和退火延伸两步,退火温度和延伸温度均为72－82℃。本发明的超长引物具有高严谨性,综合性能明显优于现行普通引物,其链熔温度提高,与标靶的专一及错配结合的强度增高而错配结合强度并不增加,本发明适用于标准PCR和反转录PCR,也可以用于竞争定量PCR和实时荧光定量PCR减少非专一产物形成,还可以用于多重PCR嵌套PCR和其它由标准PCR衍生的各种改良PCR方法,有广泛的应用前景。 |
