制备单体卡利许霉素衍生物/载体的共轭物的方法

摘要

本发明提供制备有较高药物负荷量/得率和减少凝集量的单体卡利许霉素衍生物/载体共轭物的方法。共轭物的制备是在溶液中约25℃至37℃培育卡利许霉素衍生物和蛋白质载体约15分钟至24小时，溶液包括非亲核，蛋白质相容的缓冲液，选自丙二醇，乙醇，DMSO，及其组合的助溶剂和至少包括一个C₆-C₁₈羧酸的添加剂，其pH范围约为4.0至8.5，和回收单体卡利许霉素衍生物/载体共轭物。共轭物还可在包括非亲核，蛋白质相容的缓冲液和助溶剂叔丁醇的溶液中培育卡利许霉素衍生物和蛋白质载体。

主权项

1.一种制备有较高药物负荷量/得率和减少凝集量的单体卡利许霉素衍生物/载体共轭物的方法，共轭物有化学式 Pr(-X-S-S-W)m 其中：Pr为一种蛋白质载体，X是一种连接剂，它包括有任何可与蛋白质载体反应的活性反应基团的产物，W是通过除去天然存在的甲基三硫化物基团后形成的卡利许霉素基团；m是0.5至15的数，所述方法包括步骤：(1)使卡利许霉素衍生物和蛋白质载体在一个非亲核的，蛋白质相容的，pH范围约为4.0至8.5的缓冲液中培育，溶液还包括(a)一种选自丙二醇，乙醇，DMSO，及其组合的助溶剂，和(b)一种至少包括一个C6-C18羧酸的添加剂，其中培育在约25℃至约37℃进行约15分钟至约24小时；和(2)纯化步骤(1)生成的共轭物以生产单体共轭物。