| 摘要 |
生产提纯的有催化活性的重组memapsin 2蛋白酶(以下简译为M2蛋白酶)的方法已被开发。有催化活性的酶的底物及其取代位点(subsite)的特异性也已被确定。底物和取代位点的特异性信息被用于设计天然M2蛋白酶底物类似物,其可抑制M2蛋白酶功能。此底物类似物是以显示出与M2蛋白酶天然肽底物相关肽的序列为基础的。底物类似物至少包含一个不能被M2蛋白酶剪切的类似的酰胺键。包括在关键氨基酸残基位点上的等配物的两种底物类似物的合成过程已被发现,底物类似物(OMR99－1和OM99－2)已被合成。OM99－2是以八肽[谷氨酸－缬氨酸－天冬酰胺－亮氨酸－丙氨酸－丙氨酸－谷氨酸－苯丙氨酸(序列鉴定号:28)]为基础的,用一过渡状态的等配物羟乙烯基代替了亮氨酸－丙氨酸肽键(图1)。OM99－2的抑制常数相对于重组前M2蛋白酶为1.6×10<SUP>9</SUP>M。与此抑制物密切关联的M2蛋白酶的晶体学被用于鉴定蛋白质的三维结构以及结合的各种残基的重要性。此信息可被本领域的技术人员应用于使用商业上可得到的软件程序和有机化学及酶学通晓的技术设计新的抑制剂,设计新的M2蛋白酶的抑制剂,也可应用于诊断学以及治疗和(或)预防阿尔茨海默氏症。 |
