一种总胆汁酸的测定方法及测定试剂

摘要

本发明公开了一种总胆汁酸的测定试剂及测定方法,它是利用3α－羟类固醇脱氢酶及硫代氧化型辅酶(Thio－NAD)特异性氧化胆汁酸,氧化后生成3－酮类固醇、还原型辅酶(NADH)和酮类固醇硫代氧化型辅酶(Thio－NADH),在此,生成的3－酮类固醇在3α－羟类固醇脱氢酶及还原型辅酶(NADH)存在下,又生成胆汁酸及氧化型辅酶(NAD),如此反应循环往复,从而放大微量的胆汁酸量,产生大量的水溶性黄色非染料酮类固醇硫代氧化型辅酶(Thio－NADH),最后测定生成的Thio－NADH的吸光度变化,即测得胆汁酸值。采用本发明来测定总胆汁酸,使用方便、稳定性好、清除干扰明显、灵敏度与现有技术相比可提高20倍左右,对生化仪器管道无污染,使之在对胆汁酸的准确、快速的临床测定中具有十分积极的现实意义。

主权项

1、一种总胆汁酸的测定方法，它包括采用3α-羟类固醇脱氢酶，其特征是利用3α-羟类固醇脱氢酶及硫代氧化型辅酶(Thio-NAD)特异性氧化胆汁酸，氧化后生成3-酮类固醇、还原型辅酶(NADH)和酮类固醇硫代氧化型辅酶(Thio-NADH)，在此，生成的3-酮类固醇在3α-羟类固醇脱氢酶及还原型辅酶(NADH)存在下，又生成胆汁酸及氧化型辅酶(NAD)，如此反应循环往复，从而放大微量的胆汁酸量，产生大量的水溶性黄色非染料酮类固醇硫代氧化型辅酶(Thio-NADH)，最后测定生成的Thio-NADH的吸光度变化，即测得胆汁酸值。