| 主权项 |
1.一种重组多之制造方法,包括: (a)在宿主细胞内引进表现载体,包括: (1)可在宿主细胞内调节转录的DNA序列,在操作上连 接至 (2)对熔化蛋白质编码的嵌合DNA序列,包括(a)对自动 催化成熟原所衍生前编码的DNA序列,于阅读框 内连接至(b)对前异质并对重组多编码的DNA序 列,在操作上连接至 (3)对宿主细胞内功能性的终端区编码之DNA序列 (b)使宿主细胞成长,产生该熔化蛋白质;和 (c)在体外条件下改变熔化蛋白质的环境,包括改变 pH、改变浓度、改变温度,或调节容许自动催化 裂解的化学剂浓度,使前从熔化蛋白质裂解,释 出重组多者。2.如申请专利范围第1项之方法,其 中该前系自朊(蛋白酵素)衍生者。3.如申请专 利范围第1项之方法,其中该前系自门冬氨酸朊 、丝氨酸朊或半胱氨酸朊衍生者。4.如申 请专利范围第1项之方法,其中该前系自选自包 含凝酪酵素、胰朊原、胃朊、HIV-1朊、胃 朊原、组织蛋白、或酵母朊A者。5.如申请 专利范围第1项之方法,其中异质DNA序列为水蛭素 或鲤鱼成长贺尔蒙者。6.如申请专利范围第1项之 方法,其中嵌合DNA序列不含对原的成熟型编码之 序列者。7.如申请专利范围第1项之方法,其中改变 pH包括改变pH到pH从约2至约4.5者。8.如申请专利范 围第1项之方法,其中在步骤(c)添加自动催化成熟 原之成熟型,该原对前为同质者。9.如申请 专利范围第1项之方法,其中在步骤(c)添加自动催 化成熟原之成熟型,该原对前为异质者10.如 申请专利范围第8或9项之方法,其中成熟原是在 体外条件下添加者。图式简单说明: 图1为GST凝酪酵素前水蛭素序列的核酸(序列识 别1号)和类推氨基酸序列(序列识别2号); 图2为标贴凝酪酵素前鲤鱼成长贺尔蒙(His-Pro-cGH )熔化蛋白质的聚组氨酸之核酸(序列识别3号)和类 推氨基酸序列(序列识别4号); 图3为Pro-cGH熔化构造的简图; 图4表示净化His-Pro-cGH的体外裂解; 图5表示净化His-Pro-cGH的体内裂解。 |
