应用同源重组定向克隆和亚克隆的方法和组合物

摘要

本发明涉及应用细菌重组酶介导的同源重组技术进行DNA亚克隆的方法和组合物。本发明涉及克隆的方法,含有用作克隆载体的多核苷酸的组合物,含有所述多核苷酸组合物的细胞,以及由细菌重组酶介导的克隆试剂盒,所述重组酶如RecE/T和Redα/β。

主权项

1.一种将双链靶DNA导入载体的方法，包括培养表达功能性重组酶的细菌，所述细菌细胞包括(a)靶DNA，含有第一个双链末端和第二个双链末端，以及(b)载体DNA，在载体DNA链上以下述顺序含有：(i)第一个双链同源臂(ii)复制起点，以及(iii)第二个双链同源臂，这样，载体DNA链的第一个同源臂序列与靶DNA链的第一个末端序列同源，载体DNA链的第二个同源臂序列与靶DNA链的第二个末端序列同源，这样，靶DNA可以在同源臂之间插入载体DNA中。