| 主权项 |
1.一种具有通式(I)之寡核酸共轭物, N-(B-K)n (I) 其中N为寡核酸, B为化学键或连接成份,其产生N和K间之连接,及 K为错合剂或放射性金属同位素或稳定同位素之错 合物,该稳定同位素 -系由自外在之辐射转变成放射性同位素, -将自外在之辐射转变成不同质、不同能量和∕或 不同波长之辐射, 该等同位素为原子数5.21-29.31.39.42-44.49.57-83或85之 元素,及 n为1至10间之数字;其特征在于N为具5至200个核酸 之寡核酸,其中 a)糖单元之2'-位置,各自独立地由以下之基团所占 有: 基团-OR,其中 R为具1至20个碳原子之烷基,其视情况含多至2个羟 基及其视情况由1-5个氧原子所中断, 氢原子, 羟基, 氟原子, 胺基团, 胺基 及羟基群,存在于末端位置3'和5',各自独立地,视情 况与基团R醚化和∕或 b)磷酸二酯,视情况作为内核酸键,各自独立地由 硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯或烷基膦酸酯,较佳地 甲基膦酸酯置换,和∕或 c)在3'-和5'-位置上之末端基团系以内分子方式由 如在b)中所述之内核酸键互相连结和∕或 d)其含如在b)中所述之内核酸键,其连结3'-3'-或5' -5'-位置,和∕或 e)其含如在b)中所述之磷酸二酯键,其在3-位置上由 C2-C10羟基烷基分别醚似地连接2个胸或以另一个 糖在2'-或3'-或5'-位置上之羟基醚似地连接类似地 取代之胸基团和∕或 f)在3'-和5'-位置上之末端基团含视情况如在b)中所 述地修饰之内核酸键。2.根据申请专利范围第1 项之寡核酸共轭物,其中寡核酸N包括15至100个 核酸。3.根据申请专利范围第1项之寡核酸共 轭物,其中N为寡核酸,其特异地,在高结合亲和力 下与其他标的结构结合及其可在以下获得:具随机 序列之寡核酸与标的结构放在一起,及某些寡核 酸在相对于寡核酸之混合物下展现对标的结 构之增加之亲和力,后者自寡核酸混合物之剩余 部分分开,然后对标的结构具增加亲和力之寡核 酸经放大,以获得寡核酸之混合物,其展现在标 的结构上结合之增加量之寡核酸。4.根据申请 专利范围第1项之寡核酸共轭物,其中N为寡核 酸,其特异地,在高结合亲和力下与其他标的结构 结合及其可在以下获得: a)首先,DNA股系由化学合成产生,以致此DNA股在3'-端 上展现界定之序列、其与RNA聚合之启动基因互 补及在同时与聚合链反应(PCR)之引子互补,及以 致此DNA股在5'-端上展现界定之DNA序列,其与聚合 链反应之引子序列互补,及在界定序列间之序列含 随机序列,及在以下 b)此DNA股在互补之RNA股上藉RNA聚合之助转录,及 所供予聚合之核酸系在糖单元之2'-位置上经 修饰,及在以下 c)以此方式产生之RNA寡核酸与其上可特异地结 合着寡核酸之标的结构放在一起,及在以下 d)已在标的结构上结合之该等寡核酸先与标的 结构一起自非结合之寡核酸分开及然后结合之 寡核酸再自标的结构分开,及在以下 e)此些标的结构特异之RNA寡核酸藉逆转录之 助在互补之DNA股上转录,及在以下 f)此些DNA股使用界定之引子序列藉聚合链反应 之助放大,及在以下 g)以此方式放大之DNA寡核酸然后再藉RNA聚合 之助及在RNA寡核酸上用修饰之核酸转录,及在 以下 h)上述之选择步骤c)至g)视情况经重覆,通常直至对 标的结构具高结合亲和力特征之寡核酸经足够 地选定,及然后如此而得之寡核酸序列视情况可 以测定5.根据申请专利范围第1项之寡核酸共轭 物,其中该标的结构系选自于大分子、高等生物之 组织结构,如动物或人、人或动物之器官或部份器 官、细胞、肿瘤细胞或肿瘤。6.根据申请专利范 围第1项之寡核酸共轭物,其连接成份B系结合 a)由CH3-OH基至在4'-位置上还原之寡核酸基N之4'- 端和∕或 b)由氢原子至在3'-位置上还原之寡核酸基N之3'- 端和∕或 c)至磷酸二酯桥,在两个核酸间各由OH基还原和 ∕或 d)至1至10个核盐基,其在5-、8-位置上分别由氢原子 和∕或在2-、4-或6-位置上由胺基还原。7.根据申 请专利范围第6项之寡核酸共轭物,a)或b)段,其中 B具式X-Y-Z1,其在X侧与错合剂或错合物及在Z侧与寡 核酸连接,其中 X为直接键、-NH或-S基团, Y为直链、支链、饱和或不饱和之C1-C20伸烷基链, 其视情况含1-2个伸环己基、1-5个亚胺基、1-3个伸 苯基、1-3个伸苯亚胺基、1-3个伸苯氧基、1-3个羟 基伸苯基、1-5个醯胺基、1-2个醯基、1-5个羰基 、1-5个伸乙氧基、1个基、1个硫基、1-2个羰 基烷基亚胺基、1-2个酯基、1-3个基团Ar,其中Ar代 表饱和或不饱和之5-或6-环,其视情况含1-2个选自 氮、氧和硫之杂原子和∕或1-2个羰基;HO个氧、1-5 个氮和∕或1-5个硫原子,和∕或视情况由1-5个羟基 、1-2个氢硫基、1-5个氧基、1-5个硫氧基、1-3个羧 基、1-5个羧基C1-C4烷基、1-5个酯、1-3个胺基、1-3 个羟基C1-C4烷基、1-3个C1-C7烷氧基取代,及 Z1代表-CONH-CH2-4'、NH-CO-4'、-O-P(O)R1-NH-CH2-4'、-O-P(O)R 1-O-CH2-4'、-O-P(S)R1-O-3'或-O-P(O)R'-O-3',其中4'或3'指示 与末端糖单元之键连及R1为O-、S-、C1-C4烷基或NR2R3 基团,而R2和R3意指氢或C1-C4烷基 。8.根据申请专利 范围第6项之寡核酸共轭物,c)段,其中B具式X-Y-Z2, 其在X侧与错合剂或错合物及在Z侧与寡核酸连 接,其中 Z2,在两个相邻之糖单元键连之桥中, 为基团-NR2-、-O-或-S-, X为直接键,-NH或-S基团, Y为直链、支链、饱和或不饱和之C1-C20伸烷基链, 其视情况含1-2个伸环己基、1-5个亚胺基、1-3个伸 苯基、1-3个伸苯亚胺基、1-3个伸苯氧基、1-3个羟 基伸苯基、1-5个醯胺基、1-2个醯基1-5个羟基、1 -5个伸乙氧基、1个基、1个硫基、1-2个羟基烷 基亚胺基、1-2个酯基、1-3个基团Ar,其中Ar代表饱 和或不饱和之5-或6-环,其视情况含1-2个选自氮、 氧和硫之杂原子和∕或1-2个羰基;1-10个氧、1-5个 氮和∕或1-5个硫原子,和∕或视情况由1-5个羟基、 1-2个氢硫基、1-5个氧基、1-5个硫氧基、1-3个羧基 、1-5个羧基C1-C4烷基、1-5个酯、1-3个胺基、1-3个 羟基C1-C4烷基、1-3个C1-C7烷氧基取代,及 R2为氢或C1-C4烷基。9.根据申请专利范围第6项之寡 核酸共轭物,d)段,其中B具式X-Y-Z3,其中Z3代表与 核盐基之-NH基或直接键, X为直接键,-NH或-S基团,及 Y为直链、支链、饱和或不饱和之C1-C20伸烷基链, 其视情况含1-2个伸环己基、1-5个亚胺基、1-3个伸 苯基、1-3个伸苯亚胺基、1-3个伸苯氧基、1-3个羟 基伸苯基、1-5个醯胺基、1-2个醯基、1-5个羰基 、1-5个伸乙氧基、1个基、1个硫基、1-2个羟 基烷基亚胺基、1-2个酯基、1-3个基团Ar,其中Ar代 表饱和或不饱和之5-或6-环,其视情况含1-2个选自 氮、氧和硫之杂原子和∕或1-2个羰基;1-10个氧、1- 5个氮和∕或1-5个硫原子,和∕或视情况由1-5个羟 基、1-2个氢硫基、1-5个氧基、1-5个硫氧基、1-3个 羧基、1-5个羧基C1-C4烷基、1-5个酯、1-3个胺基、1- 3个羟基C1-C4烷基、1-3个C1-C7烷氧基取代。10.根据 申请专利范围第1项之寡核酸共轭物,其中作为 摄像元素之金属错合物含选自元素铜、铋、鎝、 铼或铟之放射性同位素。11.一种侦测标的结构之 方法,其中一或多种根据申请专利范围第1至10项中 任一项之寡核酸共轭物系与所要研究之样品在 体外放在一起,及基于讯号,其经侦测是否其上特 异地和在高结合亲和力下结合着寡核酸N之标的 结构存在于样品中。12.根据申请专利范围第1至10 项中任一项之寡核酸共轭物,系用于放射诊断和 ∕或放射疗法。13.一种供体内和∕或体外侦测标 的结构之诊断套组,其中该诊断套组含至少一种根 据申请专利范围第1至10项中任一项之寡核酸共 轭物。14.根据申请专利范围第1项之寡核酸共轭 物,其中N为非天然来源之寡核酸配位体,其对标 的分子具特异之结合亲和力,如此之标的分子为非 多核酸之三级化学结构.其经一种机构与该寡核 酸配位体结合,其机构优势地依赖华特生∕克里 克(Watson/Crick)盐基配对或三螺旋结合,其中该寡核 酸配位体不为具由标的结构结合之已知生理功 能之核酸。图式简单说明: 图1显示环状错合剂K之选择,其可有利地用于本发 明。“b"标记在连接成份B上之结合部位。 图2和3显示开链错合剂K之选择,其可有利地用于本 发明。 |
