一种将外源基因转入灵芝的方法

摘要

本发明公开了一种将外源基因转入灵芝的方法,用溶壁酶将灵芝菌丝体酶解成原生质体,所制备的原生质体经精制、纯化后,利用PTC转化缓冲液,以纯化的灵芝原生质体作为受体细胞,将含有外源基因的真菌表达载体转入灵芝原生质体中,再将转化后的灵芝原生质体进行再生培养和选择性培养,从而获得灵芝转化株。本方法的转化效率可达60－100个转化子/μgDNA.10⁷转化子,能高效地将外源基因转入并整合到灵芝基因组DNA中,并使外源基因得到高效表达和稳定的遗传,从而建立了灵芝的高效转化系统;这将为利用基因工程技术改良灵芝的药用品质奠定基础,使得灵芝这一宝贵的中药资源得到更充分的利用和开发。

主权项

1、一种利用PTC转化缓冲液将外源基因转入灵芝的方法，其特征是用溶壁酶将灵芝菌丝体酶解成原生质体，所制备的原生质体经精制、纯化后，利用PTC转化缓冲液，以纯化的灵芝原生质体作为受体细胞，将含有外源基因的真菌表达载体转入灵芝原生质体中，再将转化后的灵芝原生质体进行再生培养和选择性培养，从而获得灵芝转化株。