幽门螺杆菌ureC基因片段表达工程菌的构建及其产物的制备方法

摘要

本发明公开了幽门螺杆菌ureC基因片段表达工程菌的构建及其产物的制备方法。该构建方法包括:从幽门螺杆菌中提取总DNA;用PCR方法从基因组DNA中扩增ureC基因片段;将ureC基因片段连接在表达载体pBV220上;将重组表达载体ureC－pBV220转化入大肠杆菌DH5α中获得工程菌。将工程菌发酵培养,经诱导、表达及纯化,获得目的蛋白。该方法获得的重组蛋白有高度的抗原性,将为免疫学检测ureC阳性Hp感染的方法提供抗原,还可制成疫苗用于ureC阳性Hp感染的预防及治疗。

主权项

1、一种幽门螺杆菌ureC基因片段表达工程菌的构建，其特征在于：选取幽门螺杆菌DNA中的ureC基因片段，其核苷酸及对应的氨基酸序列如下：ATG TTA GGC ATT GCT GCC GGA TTG TAT TTT AAA AAA CAT TCT CAA M L G I A A G L Y F K K H S QACG AAT AAA ATT CTA ATC GGT AAA GAC ACC AGA AAA AGC GGC TAT T N K I L I G K D T R K S G YATG GTA GAA AAC GCT TTA GAG AGC GCT CTC ACT TCC ATA GGC TAT M V E N A L E S A L T S I G YAAT GTG ATT CAA ATA GGG CCT ATG CCT ACC CCT GCG ATT GCG TTT N V I Q I G P M P T P A I A FTTA ACC GAA GAC ATG CGC TGT GAT GCG GGC ATC ATG ATA AGC GCG L T E D M R C D A G I M I S AAGC CAC AAC CCT TTT GAA GAC AAT GGC ATT AAG TTT TTC AAT TCT S H N P F E D N G I K F F N STAT GGC TAT AAG CTT AAA GAA GAA GAA GAA AAA GCG ATT GAA GAA Y G Y K L K E E E E K A I E EATC TTC CAT GAT GAA GAA TTA CTG CAC TCT AGC TAT AAA GTG GGC I F H D E E L L H S S Y K V GGAG AGC ATC GGC AGT GCT AAA AGG ATA GAC GAT GTC ATA GGG CGC E S I G S A K R I D D V I G RTAT ATC GTG CAT TTA AAA CAC TCT TTC CCC AAA CAT TTG AAT TTA Y I V H L K H S F P K H L N LCAG AGT TTA AGG ATC GTG CTA GAT ACC GCT AAT GGT GCG GCT TAT Q S L R I V L D T A N G A A YAAG GTG GCT CCG GTC GTT TTT AGC GAG CTT GGG GCT GAT GTG TTA K V A P V V F S E L G A D V LGTG ATT AAT GAT GAG CCT AAT GGG TGT AAT ATT AAT GAG CAA TGC V I N D E P N G C N I N E Q CGGG GCT TTA CAC CCT AAC CAA TTG AGC CAG GAA GTG AAA AAA TAC G A L H P N Q L S Q E V K K YCGC GCG GAT TTA GGC TTT GCT TTT GAT GGC GAT GCC GAC AGG CTA R A D L G F A F D G D A D R LGTG GTG GTG GAT AAT TTA GGG AAT ATC GTG CAT GGG GAT AAG CTT V V V D N L G N I V H G D K LTTA GGG GTG TTA GGG GTT TAT CAA AAA ACT AAA AAC GCC CTT TCT L G V L G V Y Q K T K N A L STCT CAA GCG GTT GTC GCC ACG AGC ATG AGC AAT TTA GCC CTT AAA S Q A V V A T S M S N L A L KGAA TAC TTA AAA TCC CAA GAT TTA GAA TTA AAG CAT TGC GCG ATT E Y L K S Q D L E L K H C A IGGG GAT AAG TTT GTG AGC GAA TGC ATG CGA TTG AAT AAA GCC AAT G D K F V S E C M R L N K A NTTT GGA GGC GAG CAA AGC GGG CAT ATC ATT TTT AGC GAT TAC GCT F G G E Q S G H I I F S D Y AAAA ACC GGC GAT GGC TTG GTG TGT GCT TTG CAA GTG AGC GCG CTT K T G D G L V C A L Q V S A LGTG TTA GAA AGT AAG CAA GTG AGC TCT GTT GCG TTA AAC CCC TTT V L E S K Q V S S V A L N P FGAA TTA TAC CCC CAA AAC CTA GTG AAT TTG AAT GTC CAA AAA AAG E L Y P Q N L V N L N V Q K KCCT CCT TTA GAA AGC CTG AAA GGT TAT AGC GCT CTT TTA AAA GAA P P L E S L K G Y S A L L K ETTA GAC AAG CTA GAA ATC CGC CAT TTG ATC CGT TAT AGC GGC ACT L D K L E I R H L I R Y S G TGAA AAC TGA E N