| 摘要 |
<p>본 발명은 복제동물의 생산방법에 이용할 수 있는 성숙난자의 탈핵방법에 관한 것으로서, 탈핵시킬 성숙난자가 놓인 작업용 디쉬를 조작판위에 놓고 조작장치의 왼쪽 암에는 고정용 피펫을, 오른쪽에는 절개용 피펫을 장착시키는 단계; 상기 피펫을 상하로 움직여 고정용 피펫의 12시 방향에 제 1 극체가 위치하도록 하고, 고정용 피펫을 성숙난자의 9시 방향에 밀착시킨 뒤 유압을 걸어 난자를 고정시키는 단계; 절개용 피펫을 1시 방향에서 찔러서 투명대를 통과시킨 뒤 세포질이 다치지 않도록 주의하며 11시 방향으로 관통시키고, 고정용 피펫에 양압을 걸어 성숙난자를 분리하고 고정용 피펫을 절개 피펫이 통과한 제 1극체 상단부의 투명대에 접촉시킨 후, 2개 피펫을 마찰하여 투명대를 절개하는 단계; 및 상기 절개된 난자를 회전시켜 절개창을 수직으로 위치시킨 후 고정용 피펫을 성숙난자의 밑 부위에 위치시켜 성숙난자가 아래쪽으로 움직이지 못하도록 받친 뒤 절개 피펫을 성숙난자의 위에서 눌러 제 1극체를 포함하여 세포질을 10∼30% 제거하여 탈핵시키는 단계를 포함한다. 또한, 고정용 피펫과 절개용 피펫을 사용하여 성숙난자의 절개창을 3시방향에서 수직으로 회전시킨 후, 고정용 피펫과 절개 피펫을 아래 위에서 눌러서 제 1 극체를 포함하여 세포질의 10∼30% 제거하여 탈핵을 실시할 수도 있다.</p> |
