用于扩增核酸序列的方法

摘要

一种简便有效扩增核酸序列的方法,其特征在于在存在嵌合寡核苷酸引物的情况下完成DNA合成反应;一种提供大量DNA扩增片段的方法;一种通过联用上述方法和另一种核酸序列扩增方法而扩增核酸序列的有效方法;一种检测核酸序列的方法,它用于检测或定量微生物,例如病毒、细菌、真菌或酵母;以及一种检测上述方法原位获得的DNA扩增片段的方法。

主权项

1.一种扩增核苷酸序列的方法，其特征在于所述方法包括：(a)用至少一种与所述核酸的核苷酸序列基本互补的引物和DNA聚合酶处理模板核酸，以合成与所述模板互补的引物延伸链，其中所述引物为包含脱氧核糖核苷酸和核糖核苷酸的嵌合寡核苷酸引物，所述核糖核苷酸位于所述引物的3’-末端或3’-末端侧上，以便用一种内切核酸酶进行切割；(b)用所述内切核酸酶在包含所述核糖核苷酸的位点切割步骤(a)获得的双链核酸的引物延伸链；以及(c)用具有链置换活性的DNA聚合酶，从所述双链核酸引物部分的3’-末端延伸与所述模板互补的核苷酸序列，其中切割步骤(b)获得的引物延伸链实现链置换。