| 摘要 |
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von transgenen, fertilen, einkeimblättrigen Pflanzen, insbesondere die Herstellung von transgenem Weizen, Gerste und Roggen, durch Einführung von Fremd-DNA unter Erreichung stabiler Vererbung der Transgenexpression in sexuellen Nachkommenschaften. Die Erfindung besteht aus drei Varianten, die zur raschen Erstellung von fertilen und normalen transgenen, einkeimblättrigen Pflanzen führen. Die Erfindung resultiert in einer Minimierung des Auftretens von somaklonaler Variation. Diese häufig während der Gewebekultur und Selektion von genetischen Transformationsereignissen bei einkeimblättrigen Kulturpflanzen anftretende Mutagenese führt häufig zu unerwünschten Eigenschaften, wie Fertilitätsstörungen oder verringerter Wüchsigkeit und Ertragsfähigkeit bis hin zu Verlust der Regenerationsfähigkeit der Gewebekulturen zu Pflanzen. Weizen und Gerste sind Beispiele für Pflanzen, die aufgrund häufig auftretender gewebekulturbedingter Mutagenese schwer aus Gewebekulturen zu Pflanzen zu regenerieren sind und damit schwer genetisch transformierbar sind. Roggen ist ein Beispiel für Pflanzen die aufgrund besonders häufiger gewebekulturbedingter Mutagenese besonders schwer aus Gewebekulturen zu Pflanzen zu regenerieren ist und damit besonders schwer genetisch transformierbar ist. Die dargestellten Verfahren beinhalten Beispiele der Erstellung fertiler transgener Pflanzen von Roggen, Weizen und Gerste mittels biolistischem- und <i>Agrobacterium-</i> vermitteltem Gentransfer, sowie deren generative Nachkommenschaften mit stabiler Transgenintegration und Expression. Die erfindungsgemässen Verfahren erfordern lediglich weniger als zwei bis maximal drei Monate vom Zeitpunkt der Explantatgewinnung bis zur Übertragung der transgenen Pflanzen in Erde.
|
