| 主权项 |
1.一种在免疫胜任细胞中诱使IFN-之多前驱物 转化成活性形式的酵素,该酵素具有下列物化性质 : (1)分子量 SDS-PAGE分析显示分子量约为 25,000和约10,000道耳顿; (2)N-终端胺基酸序列 具有选自SEQ ID:4的胺基酸序列(其中符号"Xaa"系为" 异亮胺酸"或"苏胺酸")或SEQ ID:5的胺基酸序列;及SEQ ID:4: SEQ ID:5 (3)抑制剂 可被碘乙醯胺及乙醯基-L-门冬氨醯-L-谷醯基-L-二 乙基戊醯胺-L-天冬-1-酸抑制。2.根据申请专利范 围第1项之酵素,该酵素将该前驱物之N终端区域内 SEQ ID:1中所含天冬胺酸36与酪胺酸37之间的键切 开; SEQ ID:1:3.根据申请专利范围第1项之酵素,其系作用 于具SEO ID:2胺基酸序列之该前驱物,将其转化成在N -终端区域里具有SEO ID:3胺基酸序列的活性形式,SEQ ID NO:2中记号"Xaa"系为"异亮胺酸"或"苏胺酸"; SEQ ID:2: SEQ ID:3:4.根据申请专利范围第1项之酵素,其系从人 类造血细胞获得。5.一种当做酵素的蛋白质,该酵 素系在免疫胜任细胞内诱使IFN-之多前驱物转 化成活性形式,该蛋白质具有下列物化性质: (1)作用 该酵素将该前驱物N-终端区域中完整或部分之SEQ ID NO:1所含之天冬胺酸36与和酪胺酸37之间的键 切开; (2)分子量 SDS-聚丙烯醯胺凝胶电泳分析显示的分子量约为25, 000和约10,000道耳顿; (3)N-终端胺基酸序列 具有选自SEQ ID:4的胺基酸序列(其中符号"Xaa"系为" 异亮胺酸"或"苏胺酸")或SEQ ID:5的胺基酸序列; (4)抑制剂 可被乙醯基-L-门冬氨醯-L-谷醯基-L-二乙基戊醯胺- L-天冬-1-酸及碘乙醯胺抑制;及 (5)制造的细胞 可从人类造血细胞获得。6.一种制造如申请专利 范围第1项之酵素的方法,该方法包括使制造该酵 素的细胞增殖及从已增殖的细胞收集所制得的酵 素。7.根据申请专利范围第6项的方法,其中该细胞 系为人类红细胞生成素细胞。8.根据申请专利范 围第6项的方法,其包括将该细胞移植至非人类温 血动物身上,及增殖该细胞并获得动物体液。9.根 据申请专利范围第8项的方法,其中该动物系为啮 齿类。10.根据申请专利范围第6项的方法,其中该 酵素系藉由一或多种选自下列之方法收集,包括盐 析、透析、过滤,浓缩、分离沈淀、离子交换色层 分离法、凝胶过滤色层分离法、吸附色层分离法 、等电点性色层分离法、疏水性色层分离法、逆 相色层分离法、亲和性色层分离法、凝胶电泳及 等电点聚焦法。11.一种制造如申请专利范围第5项 之蛋白质的方法,该方法包括增殖该人类造血细胞 ,及自增殖和从已增殖的细胞收集所制得的酵素。 12.根据申请专利范围第11项的方法,其中该细胞系 为人类红细胞生成素细胞。13.根据申请专利范围 第11项的方法,其包括将该细胞移植至非人类温血 动物身上,及增殖该细胞并获得动物体液。14.根据 申请专利范围第13项的方法,其中该动物系为啮齿 类。15.根据申请专利范围第11项的方法,其中该蛋 白质系藉由一或多种选自下列之方法收集,包括盐 析、透析、过滤,浓缩、分离沈淀、离子交换色层 分离法、凝胶过滤色层分离法、吸附色层分离法 、等电点性色层分离法、疏水性色层分离法、逆 相色层分离法、亲和性色层分离法、凝胶电泳和 等电点聚焦法。16.一种转化多的方法,其包括将 申请专利范围第1项的酵素与在免疫胜任细胞中诱 使产生干扰素-之多前驱物接触,藉以将该前 驱物转化成活性形式。17.根据申请专利范围第16 项的方法,其中该前驱物包括SEQ ID:2的胺基酸序列, 其中记号"Xaa"系为"异亮胺酸"或"苏胺酸"。18.根据 申请专利范围第16项的方法,其中该活性形式在N- 终端区域包括SEQ ID:3的胺基酸序列。19.根据申请 专利范围第16项的方法,其中该活性形式包括SEQ ID: 6的胺基酸序列,其中记号"Xaa"系为"异亮胺酸"或"苏 胺酸"; SEQ ID:6:20.一种转化多的方法,其包括将申请专利 范围第6项的蛋白质与在免疫胜任细胞内诱使产生 干扰素-之多前驱物接触,藉以将该前驱物转 化成活性形式。21.根据申请专利范围第20项的方 法,其系将该前驱物N-终端区域中完整或部份之SEQ ID NO:1所含之天冬胺酸36与酪胺酸37之间的键切 开。22.根据申请专利范围第20项的方法,其中该前 驱物包括SEQ ID:2的胺基酸序列,其中记号"Xaa"系为" 异亮胺酸"或"苏胺酸"。23.根据申请专利范围第20 项的方法,其中该活性形式在N-终端区域里具有SEQ ID:3的胺基酸序列。24.根据申请专利范围第20项的 方法,其中该活性形式具有SEQ ID:6的胺基酸序列,其 中记号"Xaa"系为"异亮胺酸"或"苏胺酸"。图式简单 说明: 图1系为包含编码本发明多前驱物之cDNA的重组 DNA pRCHuGF结构。 图2系为一种显示在萤幕上并为Western Blotting看得 见之凝胶电泳图型的中间图式,其显示在本发明多 前驱物转化成活性形式期间随时间的变化。 |
