| 主权项 |
1.一种突变型异戊烯二磷酸酯合成,其中位在原 始,异戊烯二磷酸酯合成,保存区中第二区之 天门冬胺酸富藏区DDXX(XX)D(括弧中两个X可能不表 现)N-端且由N-端方向自D算起第五位置的胺基酸残 基被其他胺基酸取代,该其他胺基酸系选自丙胺酸 、胱胺酸、天门冬胺酸、麸胺酸、苯丙胺酸、甘 胺酸、组织胺酸、异白胺酸、离胺酸、白胺酸、 甲硫胺酸、天门冬醯胺、脯胺酸、麸胺醯胺、精 胺酸、丝胺酸、苏胺酸、缬胺酸、及色胺酸,其中 该原始(异戊烯二磷酸酯合成)具有SEQ ID. No:1 所示之胺基酸序列: SEQ ID No:12.如申请专利范围第1项之,其中该异戊 烯二磷酸酯合成是法呢基二磷酸酯合成、牻 牛儿牻牛儿基二磷酸酯合成、六异戊烯二磷酸 酯合成、七异戊烯二磷酸酯合成、八异戊烯 二磷酸酯合成、九异戊烯二磷酸酯合成、或 十一异戊烯二磷酸酯合成。3.如申请专利范围 第1或第2项之,其中该异戊烯二磷酸酯合成是 一种热稳定。4.如申请专利范围第1项之,其中 该异戊烯二磷酸酯合成是法呢基二磷酸合成酸, 且在具有SEQ ID No:1胺基酸序列之法呢基二磷酸酯 合成81位置的酪胺酸被该其他胺基酸取代。5.一 种DNA,其编码如申请专利范围第1至4项中任一项之 ,其中该原始具有SEQ ID No:1列示之胺基酸序列 。6.一种RNA,其系由如申请专利范围第5项之DNA转录 。7.一种生产具20至30个碳原子之异戊烯二磷酸酯 的方法,其特征为,令申请专利范围第1至4项中任一 项之与受质接触反应,该受质系选自异戊烯二磷 酸酯、二甲丙烯基二磷酸酯、法呢基二磷酸酯与 牻牛儿牻牛儿基二磷酸酯。图式简单说明: 第1图显示所获得之19个突变型BstFPSs(B. stearothermophilus FPP合成)与一个野生型BstFPS(样本 命名为Y)之酵素活性的图表。〝引子DMAPP〞指示 DMAPP被用来做为丙烯基基质。〝引子GPP〞指示GPP 被用来做为丙烯基基质,而〝引子FPP〞指示FPP被用 来做为丙烯基基质。在命名A至W的样本中,于81位 置导入取代作用后之胺基酸名称以单字母密码来 表示。 第2图显示当DMAPP被用来做为丙烯基基质时,突变型 BstFPSs反应之脱磷酸化产物的TLC发展状态的照片。 Y81A至Y81Y表示胺基酸取代式突变。 第3图显示当GPP被用来做为丙烯基基质时,突变型 BstFPSs反应之脱磷酸化产物的TLC发展状态的照片。 Y81A至Y81Y表示胺基酸取代型突变。 第4图显示当FPP被用来做为丙烯基基质时,突变型 BstFPSs反应之脱磷酸化产物的TLC发展状态的照片。 Y81A至Y81Y表示胺基酸取代型突变。 第5图是显示当DMAPP被用来做为丙烯基基质时,酵素 活性与胺基酸侧链分子量之间相关性的图。 第6图是显示当GPP被用来做为丙烯基基质时,酵素 活性与胺基酸侧链分子量之间相关性的图。 第7图是显示当FPP被用来做为丙烯基基质时,酵素 活性与胺基酸侧链分子量之间相关性的图。 第8图是显示当DMAPP被用来做为丙烯基基质时,反应 产物之平均链长度与胺基酸侧链分子量之间相关 性的图。 第9图是显示与GPP被用来做为丙烯基基质时,反应 产物之平均链长度与胺基酸侧链分子量之间相关 性的图。 第10图是显示当FPP被用来做为丙烯基基质时,反应 产物之平均链长度与胺基酸侧链分子量之间相关 性的图。 第11图是显示不同的异戊烯二磷酸酯合成之第 一区至第七区及天门冬胺酸富藏区的图,并且胺基 酸(加星号)位于N-端方向自其末端算起第五位置。 在此图中,该序列表示法呢基二磷酸酯合成的胺 基酸序列,1是得自Bacillus stearothermophilus,2是得自 Escherichia coli,3是得自Saccharomvces cereviceae,4是得自 老鼠,5是得自于人类。 |
