应用玻化技术生产检测血糖用电化学传感器的酶电极试条

摘要

本发明涉及一种应用玻化技术生产检测血糖用电化学传感器的酶电极试条,其生产工艺包括第一步,玻态葡萄糖氧化酶的生产,取葡萄糖氧化酶溶液,加入固态玻化载体进行玻化;第二步,玻态葡萄糖氧化酶的活力检测和稳定性实验;第三步,葡萄糖氧化酶酶电极试条的玻化。本发明生产酶电极试条采用了自创玻化工艺,并在自制室温玻化机中实施,其成品包装是在设置于10万级净化室内的局部去湿柜中完成,柜内相对湿度自动恒定在25%。本发明通过室温玻化技术使酶电极试条能在室温下长期存放而活力不变。

主权项

1.一种应用玻化技术生产检测血糖用电化学传感器的酶电极试条，其特 征在于，其生产工艺包括下列步骤： 第一步，玻态葡萄糖氧化酶的生产： 取葡萄糖氧化酶溶液，加入固态玻化载体，使其终浓度达到10％，分装 入瓶；将瓶全部放入玻化机中玻化12小时；玻化毕各瓶均在机内用橡皮塞密 封，再取出封上铝盖，此即玻态葡萄糖氧化酶成品，于室温下贮存即可； 第二步，玻态葡萄糖氧化酶的活力检测和稳定性实验： 取已在室温下贮存3个月的上述玻态葡萄糖氧化酶成品5瓶(每瓶1000单 位)，放入45℃恒温箱中保温21天，与此同时，放入对照品葡萄糖氧化酶冻干 品；保温到21天时取出各样品，按经典比色法测酶活力；其结果是玻态葡萄 糖氧化酶成品活力丝毫未变，而对照品葡萄糖氧化酶冻干品的酶活力丧失了 32％，由此，玻态葡萄糖氧化酶具有最高稳定性； 第三步，葡萄糖氧化酶酶电极试条的玻化： 将本发明的一次性酶电极试条在传统的酶反应系统中添加玻化载体，使 酶电极试条呈玻态而高度稳定；本发明的试条电极采用两极材料相同而面积 不等的形式，电极材料为喷金电极，以抗空气氧化，使导电性能优良；酶反 应系统的玻化操作过程如下： (1)、酶反应系统组分的配制： 固定化载体为羟乙基纤维素和微晶纤维素的混合物，最适浓度为4.5％； 粘结剂为羧甲基纤维素，最适浓度为0.5％；电子传递中间体为铁氰化钾，最 适浓度为16％；湿润剂为TritonX-100，最适浓度为0.08％；玻态葡萄糖氧 化酶的最适加量为1750μ/ml；最适缓冲系统为pH6.2、0.34mol/L磷酸钾缓 冲液；配制时，上述各试剂分别用pH6.2、0.34mol/L磷酸钾缓冲液配制成 高浓度贮备液，使用时再按所需量组合，并过滤取清液，量体积后计算此液 中已含玻化载体量，再补加固态玻化载体使其终浓度达到10％，制成酶反应 玻化液； (2)、酶电极试条的制备： 取新生产的两极面积不等式喷金电极试条，在其加酶池和两电极接点 处，先用洗洁精清洗、蒸馏水漂清，再用消毒棉签沾无水乙醇擦洗，待乙醇 挥发干净后，把各电极试条整齐划一地装入加样盒，放到设在10万级净化室 中的全自动加液机操作平台上，喷加酶反应玻化液于试条加酶池中；在自动 加液机的贮液瓶中预先灌入上述第1项操作过程中所配制好的酶反应玻化液； 加样所需各参数也预先在其电脑控制器上设置完成； (3)、酶电极试条的玻化： 将加好酶反应玻化液的试条，连盒放入玻化机中玻化，玻化温度为45 ℃，玻化时间为40分钟；玻化完成后，在气室中把各盒加盖密闭，移入设置 在10万级净化室的局部去湿柜中，在控湿为相对湿度25％的条件下，把各酶 电极加样池粘贴薄膜盖后，将试条分装入铝箔袋中并封口，此即检测血糖用 电化学传感器的酶电极试条成品。