| 摘要 |
PUEDEN CONSEGUIRSE MEJORAS DE LA REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA (RCP) IN SITU, UN PROCESO DE AMPLIFICACION ENZIMATICA IN VITRO DE SECUENCIAS ESPECIFICAS DE ACIDOS NUCLEICOS DENTRO DE LAS CELULAS EN LAS QUE SE ORIGINAN, CAMBIANDO LA FORMA DE INICIO DE LA REACCION ENZIMATICA. EL INICIO DE LA REACCION SE RETRASA HASTA EL COMIENZO DEL CICLO TERMICO DE LA RCP, RETENIENDO UN SUBGRUPO DE RECTIVOS PARA LA RCP A PARTIR DE LA PREPARACION CELULAR HASTA QUE LA PREPARACION SE HAYA CALENTADO A 50 C - 80 C, INMEDIATAMENTE ANTES DEL COMIENZO DEL CICLO TERMICO, O AÑADIENDO A LOS REACTIVOS DE LA RCP UNA PROTEINA FIJADORA DE ADN DE BANDA UNICA QUE BLOQUEA LA REACCION A TEMPERATURAS INFERIORES A 50 C. SI LA RCP IN SITU SE LLEVA A CABO EN PREPARACIONES CELULARES QUE YA ESTAN FIJAS A UN PORTAOBJETOS, EL CICLO TERMICO TAMBIEN SE FACILITA CON EL EMPLEO DE UN BLOQUE DE MUESTRA DE CICLO TERMICO O COMPARTIMENTO OPTIMAMENTE DISEÑADO PARA SUJETAR EL PORTAOBJETOS Y CUALQUIER BARRERA DE VAPOR QUE LO CUBRA.
|
