摘要 |
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Bestimmung räumlicher Abstände auf Polymermolekülen bekannter Monomersequenz oder Komplexen solcher Polymermoleküle, wobei DOLLAR A a) die Polymermoleküle oder Komplexe umgesetzt werden mit Gemischen homo- oder hetero-bifunktionaler Cross-Linker Moleküle unterschiedlicher Länge, Masse und nötigenfalls mit unterschiedlichen Chromophoren, aber mit den gleichen Bindungsspezifitäten der reaktiven Endgruppen, DOLLAR A b) die Polymermoleküle oder Komplexe nach Reaktion mit dem Gemisch der Cross-Linker an bekannten Spaltstellen der Polymersequenzen spezifisch gespalten werden, DOLLAR A c) die entstandenen Bruchstücke vermessen werden, vorzugsweise ihre Masse bestimmt wird, DOLLAR A d) die entstandenen Bruchstücke identifiziert werden - insbesondere jene Bruchstücke, bei denen Cross-Linker zwei Residuen des Polymers oder Komplexes verknüpfen - mit Hilfe eines Vergleichs der Messergebnisse aus Schritt c) mit zu erwartenden Werten von theoretisch möglichen Bruchstücken, die auf der Basis der bekannten Daten über Monomersequenz, Spaltstellen, Cross-Linker etc. ermittelt werden, DOLLAR A e) auch bereits natürlicherweise vorhandene Verknüpfungen (in Proteinen zum Beispiel Disulfidbrücken) berücksichtigt werden, DOLLAR A f) die Länge jenes Cross-Linkers aus dem Gemisch ein Maß für den Abstand zweier Residuen ist, der die kürzeste Länge hat und den Cross-Linkern des Gemisches, die beide Residuen verknüpfen.
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