方法

摘要

本发明提供了制备高纯度白蛋白溶液的方法,该方法包括对白蛋白(优选由转化的酵母表达和分泌的)进行一系列层析步骤。优选此方法包括主动方式阳离子交换层析,主动方式阴离子交换层析,主动方式亲和层析,被动方式亲和层析(优选使用固相化氨基苯硼酸),被动方式阳离子交换层析,和被动或主动方式阴离子交换层析。本发明还公开了用于降低白蛋白溶液中镍的水平的方法,以及一种重组白蛋白编码序列,其含有两个或多个位于同一读码框架内的翻译终止密码子子。本发明还公开了产生重组白蛋白的方法,该方法包括培养能表达重组白蛋白编码序列的真菌细胞,其中所述细胞使重组表达的白蛋白发生甘露糖基化的能力降低。

主权项

1.用于生产重组白蛋白的方法，此方法包括培养能表达重组白蛋白编码序列的真菌细胞并获得所述白蛋白，其中所述细胞带一种基因修饰，该修饰能使该细胞对重组表达之白蛋白实施甘露糖基化的能力至少降低，其中培养基为至少1,000L且pH5.3-6.8。