摘要 |
Patente de Invenção: "VETORES PARA APERFEIçOAR A CLONAGEM E A EXPRESSãO EM PLASMìDIOS COM BAIXO NúMERO DE CóPIAS". Métodos que facilitam 1) a clonagem de insertos grandes em plasmídios de BAC, 2) o isolamento de grandes quantidades de DNA de BAC (por aumento do número de cópias dos plasmídios), e 3) o aumento da expressão heteróloga a partir de insertos de plasmídios de BAC (por aumento do número de cópias dos plasmídios e/ou introdução de promotores no inserto). é proporcionado um vetor para aumentar o número de cópias dos plasmídios, compreendendo um elemento transponível contendo um ponto de origem da replicação com número de cópias moderado ou alto, capaz de transposição in vitro para um plasmídio-alvo. O plasmídio-alvo é um plasmídio de cópia única ou baixa, por exemplo, um vetor de BAC, que é útil para a clonagem de grandes pedaços de DNA. O plasmídio com transposon pode conter qualquer ponto de origem da replicação com cópia moderada ou alta que seja compatível com um hospedeiro bacteriano, tal como E coli. Assim, um ori ilustrativo é o ori colE1 a partir de pBR322.
|