一种含有酰基携带蛋白样结构域的新基因P40

摘要

一种含有酰基携带蛋白样结构域的新基因P40,涉及分子生物学技术,目前已得到的抑癌基因和抑癌候选基因只有20余种,但它们没有发明抑癌基因所具有的特征:含有酰基携带蛋白样结构域;本发明新基因p40其cDNA全长2024bp,具有完整读框,编码含有357个氨基酸残基的蛋白质,后者的分子量约40kD,是正常脑组织高表达,胶质瘤组织和胶质瘤细胞系低表达或不表达的差异表达基因,可抑制胶质瘤细胞生长,是一个很好的抑癌基因。

主权项

1.一种含有酰基携带蛋白样结构域的新基因P40，其特征是：首先，分别提取正常脑组织和胶质瘤组织的mRNA，然后，分别反转录成cDNA，正常脑组织的mRNA在反转录时两端加接头；胶质瘤组织的mRNA经普通反转录成cDNA，然后通过PCR反应标记上生物素，作为扣除探针。随后，将两组cDNA进行杂交，用标在磁珠上的链亲和素吸附生物素，在磁场的作用下，去除杂交体和扣除探针(胶质瘤组织的cDNA)，所得到的即是在正常恼组织表达，而在胶质瘤组织不表达的差异表达基因；在分析这些差异表达基因时，得到一个含有酰基携带蛋白样结构域的新基因，该基因具有完整读框区，全长为2024bp，编码一个含有357个氨基酸残基的蛋白质，分子量约40kD，故命名为p40，其核酸序列及其编码的氨基酸如下(划线部分为ACP样结构域)： 1 Cgggacgcagcaaagagaggagagaccccaagtcagaaggagtgagaaccctgaccccta 61 Atcccactgcatccagccaataggagcccagccaccatggcggagctgcaggaggtgcag M A E L Q E V Q121 atcacagaggagaagccactgttgccaggacagacgcctgaggcggccaagactcactctI T E E K P L L P G Q T P E A A K T H S181 gtggagacaccatacggctctgtcactttcactgtctatggcacccccaaacccaaacgcV E T P Y G S V T F T V Y G T P K P K R241 ccagcgatccttacctaccacgatgtgggactcaactataaatcttgcttccagccactgP A I L T Y H D V G L N Y K S C F Q P L301 tttcagttcgaggacatgcaggaaatcattcagaactttgtgcgggttcatgtggatgccF Q F E D M Q E I I Q N F V R V H V D A361 cctggaatggaagagggagcccctgtgttccctttgggatatcagtacccatctctggacP G M E E G A P V F P L G Y Q Y P S L D421 cagcttgcagacatgatcccttgcgtcctgcagtacctaaatttctctacaataattggaQ L A D M I P C V L Q Y L N F S T I I G481 gttggtgttggagctggagcctacatcctggcgagatatgctcttaaccacccggacactV G V G A G A Y I L A R Y A L N H P D T541 gttgaaggtcttgtcctcatcaacattgatcccaatgccaagggttggatggattgggca601 gcccacaagctaacaggcctcacctcttccattccggagatgatccttggacatcttttcA H K L T G L T S S I P E M I L G H L F661 agccaggaagagctctctggaaattctgagttgatacaaaagtacagaaatatcattacaS Q E E L S G N S E L I Q K Y R N I I T721 catgcacccaacctggataacattgaattgtactggaacagctacaacaaccgccgagacH A P N L D N I E L Y W N S Y N N R R D 781 ctgaactttgagcgtggaggtgatatcaccctcaggtgtcctgtgatgctggtggtaggaL N F E R G G D I T L R C P V M L V V G841 gaccaagcacctcatgaagatgcagtggtggaatgtaactcaaaactggaccccacccagD Q A P H E D A V V E C N S K L D P T Q901 acctcgttcctcaagatggctgactccggaggtcagccccagctgactcagccaggcaagT S F L K M A D S G G Q P Q L T Q P G K961 ctgaccgaggccttcaagtacttcctgcaaggcatgggctacatggcctcatcctgcatgL T E A F K Y F L Q G M G Y M A S S C M1021 actcgcctgtcccggtctcgtacagcctctctgaccagtgcagcatccgttgatggcaac T R L S R S R T A S L T S A A S V D G N1081 cggtcccgctctcgcaccctgtcccagagcagcgagtctggaactctttcttcggggccc R S R S R T L S Q S S E S G T L S S G P1141 ccggggcacaccatggaggtctcctgttgaatggcccttgttgccctagagtgggaccca P G H T M E V S C1201 gccctcacctcccccagagctaacctgggaggtgctgaaggggcattgggccaccgtaag1261 caagggaaaaagggcagatcatgcggggagatgaccttgatctttgattgctaccctaac1321 cttgacctttaacccgtgattccccccagctcctggaagagatgtcctaatatctcttag1381 ggacccagacccctaaattctcctcctcccccattttgatgttaaggtggagagggcata1441 tgcatcctctgtcctgatctaggtgtctatagctgaggggtaagaggttgttgtagttgt1501 cctggtgcctccatcagactctccctacttgtcccatatttgcaaggggaggggatttgg1561 ggctggggctccattcaccaaagctgaggtggcttctcattaaccccttaggactctgaa1621 gggtatggacctacgtgaatgtgtgtcagggggagacttgctggtgggttagtggtcctc1681 aggatgtgataaaaacatccagtgtaaaaaggaagttggaatgggagttggcgggcagtg1741 aacgagtgtggggaaggattggtgctggggcaacaggaaggggcctggggccgtttggct1801 gcactaactttggtagctcagtgtgcatctaaagtgggactggggagggagctaagcttg1861 ggctgggctgcttggggcttggcatagggtggaaagggctaccctggggcttctgacccc1921 cctgtagtatgtgtggagggtgccctcccgtctcccacaacttctgctataacaataaac1981 tgtagaggaatcggaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaaa