脂解酶变体

摘要

通过改变脂解酶指定区域的氨基酸序列,以便增加所需活性水平或降低不需要之活性的水平,可对脂解酶的底物特异性进行修饰。因此,本发明人开发了带有修饰型氨基酸序列的脂解酶变体,其底物特异性已改变,适于进行特殊用途。

主权项

权利要求书1.产生脂解酶变体的方法，所述方法包括：a)选择感兴趣的底物和酯键，b)选择亲代脂解酶，其具有醇结合位点，所述位点具有含sn2位置的甘油部分，c)在所述亲代脂解酶中选择至少一个下述氨基酸残基，其包括至少一个在该亲代脂解酶和底物的三维结构中位于底物甘油三酯之甘油部分的sn2位C原子10之内的原子，d)进行改变，所述改变各为插入，缺失或取代所述氨基酸残基，e)任选在一个或多个不是b)的位置上进行改变，所述改变各为插入，缺失或取代一个氨基酸残基，f)制备由步骤b-d所得的变体，g)检测变体对选定酯键的活性，h)选择对选定酯键的活性有所改变的变体，和i)产生所选变体。