REACTIVOS Y METODOS PARA LA TRANSCRIPCION INVERSA ACOPLADA A ALTA TEMPERATURA Y REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA.

摘要

SE PRESENTAN METODOS PARA LA REPLICA Y AMPLIFICACION DE SECUENCIAS DE ARN MEDIANTE POLIMERASAS DE ADN TERMOACTIVAS. LA REACCION DE TRANSCRIPCION INVERSA SE LLEVA A CABO EN UN TAMPON APROPIADO QUE CONTIENE UN TAMPON METALICO QUE TAMPONA LA CONCENTRACION DE CATIONES DIVALENTES Y CUYO TAMPON TAMPONA PREFERENTEMENTE TANTO EL PH COMO LA CONCENTRACION DE CATIONES DIVALENTES. DICHO CATION DIVALENTE ES PREFERENTEMENTE MN2+. EN UN ASPECTO PREFERENTE DE LA INVENCION, SE COPULA UNA TRANSCRIPCION INVERSA DE ALTA TEMPERATURA A UNA AMPLIFICACION DE ACIDO NUCLEICO EN UN TUBO, UN PROCESO ENZIMATICO EN EL QUE SE UTILIZA UNA POLIMERASA DE ADN TERMOESTABLE. TAMBIEN SE PRESENTAN LOS METODOS PARA ELIMINAR LA CONTAMINACION ARRASTRADA DE LAS AMPLIFICACIONES QUE SE FORMO EN REACCIONES DE TRANSCRIPCION INVERSA ANTERIORES. SE PRESENTAN LOS REACTIVOS Y KITS PARTICULARMENTE ADECUADOS PARA LOS METODOS DE LA PRESENTE INVENCION.