用蚕表达丙肝抗原制备口服药物的方法

摘要

本发明属于生物技术制药工程中的基因工程生产多肽类药物技术领域。以家蚕幼虫、蛹作为生物反应器，通过家蚕核型多角体病毒表达系统重组带有人的丙型肝炎病毒基因，将获得的重组病毒，接种家蚕幼虫、蛹进行表达，经分离纯化，冷冻干燥，制成口服预防丙型肝炎的药物。经动物试验，80％以上小鼠产生了较强的抗体水平，首次实现丙肝抗原口服药物的发明。与现有技术相比，原料易得，生产成本低，预防效果良好，具有十分重大的市场开发应用前景。$＃!

主权项

1．一种用蚕表达丙肝病毒蛋白制备口服药物的方法，其特征在于是通过RT-PCR方法获得C+E1+E2基因片段，克隆进入pUC19获得重组质粒pUHCVCE，并克隆进入pUBM-4载体，构建成杆状病毒转移质粒pBMHCVCE；进行共转染，将人的丙型肝炎病毒基因重组进入家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori Nuclear polyhedrosis Virus)表达系统，获得重组的带丙型肝炎病毒结构基因的家蚕核型多角体病毒，该病毒已提交中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保存，保藏编号为CGMCCN0.0336，用该病毒接种家蚕幼虫、蛹和蛾进行表达，所获得的表达产物经分离纯化，冷冻干燥，以家蚕血液、蛹和蛾为填充料配制成口服防治丙型肝炎的药物。