发明名称 抗人间白素–6之重建人抗体
摘要 本发明乃抗人间白素一6(IL─6)之重建人抗体有关者,该重建人抗体由含下列L链和H链而构成:(A)L链:含有(1),人L链C领域和(2)人L链FR,以及含抗人IL一6之鼠单株抗体的L链CDR而构成L链V领域;以及(B) H链:含有(1),人H链C领域和(2)人H链FR以及含抗人IL一6之鼠单株抗体的H链CDR而构成H链V领域。此重建人抗体的大部分来自人抗体,同时鼠CDR的抗原性低,因此,本发明的重建人抗体对于人的抗原性低,所以能阻碍人IL一6所介质询传递,可期待其起因于人IL─6的疾病的治疗剂用途。
申请公布号 TW458985 申请公布日期 2001.10.11
申请号 TW083104928 申请日期 1994.05.30
申请人 中外制药股份有限公司 发明人 土屋政幸;佐藤 功;平田裕一
分类号 C07K15/28;C12N15/13 主分类号 C07K15/28
代理机构 代理人 林志刚 台北巿南京东路二段一二五号七楼
主权项 1.一种重组之抗人间白素-6抗体,其系含有, (1).(a)具有以下胺基酸序列之经(L)链可变(V)区域, 及, (b)人L链恒定(e)区域,及 (2).(a)具有以下胺基酸序列之重(H)链V区域 及, (b)人H链C区域, 所构成之H链。2.如申请专利范围第1项之抗体,其 中人L链C区域为C区域。3.如申请专利范围第1项 之抗体,其中人H链C区域为1C区域或4C区域。4. 一种DNA,其为具有下述序列号码53之核酸序列,其可 编码申请专利范围第1项之L链V区域。 序列号码535.一种DNA,其为具有下述序列号码54之核 酸序列,其可编码申请专利范围第1项之H链V区域。 序列号码546.一种如申请专利范围第1至3项中任一 项之重组之抗人间白素-6抗体的制造方法,其特征 为包含, (1)将申请专利范围第1项或第2项之含L链编码DNA所 构成的重组载体HEF-RVLSK2b及申请专利范围第1项或 第3项之含H链编码DNA所构成的重组载体HEF-RVHSK2a所 同时转化变异的宿主COS细胞进行培养,其后, (2)由前记培养物中将前记重建人抗体予以回收等 步骤所成。7.一种如申请专利范围第1至3项中任一 项之重组之抗人间白素-6抗体的制造方法,其特征 为包含, (1)将来自HEF-RVLSK2b申请专利范围第1项或第2项之含 L链编码DNA及来自HEF-RVHSK2a申请专利范围第1项或第 3项之含H链编码DNA所构成的重组载体转化变异所 得之转化变异体COS细胞进行培养,其后, (2)由前记培养物中将前记重建人抗体予以回收等 步骤所成。图式简单说明: 第一图示含有分别表现L链和H链有用的人EFI-启 动子/增强子(promotor/enhancer)而构成的表现质体( plasmid)HEF-VL-gk和HEF-VH-gr1。 第二图示含有表现本发明的抗体有用的人细胞 巨大病毒(HCMV)启动子/增强子系而构成的表现载体 。 第三图示经糖基化的SK2领域的电泳图。 第四图示结合在人IL-6上的本发明的嵌合体抗体的 功能经ELISA确认的结果。 第五图示阻碍IL-6结合在人IL-6上的本发明的嵌合 体抗体的功能经ELISA确认的结果。 第六图示制造重建人SK2领域L链V领域的第一版本( version) (「a」版本)的图样。 第七图示制造重建人SK2抗体H链V领域的第一版本( version) (「a」版本)的图样。 第八图示由重建人L链+嵌合体H链而构成抗体对于 人IL-6的结合能力的示意图。 第九图示本发明的四种重建人SK2抗体的能力和嵌 合体抗体比数其对于人IL-6的结合能力的示意图。 第十图示本发明的四种重建人化SK2抗体对于IL-6R 的IL-6的结合有关阻碍能力,分别和SK2嵌合体抗体 以及重建人抗体SK2者所比较结果。
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