摘要 |
<p>Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur parallelen Sequenzierung von mindestens zwei verschiedenen in einem Nukleinsäuregemisch enthaltenen Nukleinsäuren, wobei eine Oberfläche bereitgestellt wird, aufweisend Inseln von Nukleinsäuren jeweils gleicher Sorte, tertiäre Nukleinsäuren; die tertiären Nukleinsäuren so behandelt werden, dass die Produkte nur mit dem 5'-Ende eines Stranges eines Doppelstranges mit der Oberfläche verbunden sind; die tertiären Nukleinsäuren durch Restriktionsendonukleasen vom Typ IIS geschnitten werden, so dass 3'-überhängende Enden oder 5'-überhängende Enden erzeugt werden; eine oder mehrere Basen der tertiären Nukleinsäuren bestimmt werden; Linkermoleküle durch Ligation mit den freien Enden der tertiären Nukleinsäuremoleküle verbunden werden, wobei die Linkermoleküle eine oder mehrere Erkennungsstellen für Restriktionsendonukleasen vom Typ IIS aufweisen; die tertiären Nukleinsäuren erneut durch eine oder mehrere Restriktionsendonukleasen vom Typ IIS geschnitten werden, die Sequenzabschnitte erkennen, die in Schritt (e) durch die Linkermoleküle in die tertiären Nukleinsäuren eingeführt worden sind; und Schritte (d), (e) und (f) sooft wiederholt werden, bis die gewünschte Sequenzinformation erhalten worden ist.</p> |