使用纯化的抗原特异性抗体检测军团菌属细菌的方法

摘要

从军团菌属菌种或菌种血清型细菌分离得到基本无蛋白的O－糖或O－多糖抗原,并与活化层析柱偶联。用如此制备的层析柱纯化针对军团菌属的同一菌种或菌种血清型的未加工抗体。用得到的抗原特异性抗体在免疫化学试验中检测人中军团病、庞蒂亚克热和其它军团菌导致的疾病,并用于检测环境样品中的军团菌属细菌。本发明详细描述了一种在免疫层析试验装置中进行的快速、高特异性和灵敏的侵肺军团菌血清1型的免疫试验。

主权项

1．一种从已知军团菌属菌种，或菌种血清型的细菌中获得基本无蛋白的糖或多糖抗原的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：(a)培养所述细菌一段必需时间，以获得所需大小的样品，并以湿细胞沉淀的形式从所述样品中收集细菌细胞；(b)将所述湿细胞沉淀悬浮在碱性溶液中，并混合；(c)用强酸将pH调节到酸性pH并离心；(d)分离步骤(d)的上清液，并将所述上清液的pH调节到近似中性；(e)用广谱蛋白酶制备物消化该产物，以破坏剩余蛋白质；(f)用弱碱水溶液将pH调节到碱性一侧；(g)在用弱碱溶液平衡的大小排阻柱上分离出基本无蛋白的糖或多糖抗原；和(h)合并第一峰中洗脱下来的材料，并将所述材料的pH调节至近似中性。