植物可选择标记物和植物转化方法

摘要

本发明涉及用可选择标记物基因转化宿主植物细胞的植物转化表达盒。序列中按5’到3’方向可操作地连接的所述盒包括(i)来自水稻β葡聚糖酶9基因(Gns9);(ii)可选择标记基因,和(iii)3’未翻译终止子区。同时公开的是含有转化载体的表达盒子对,获得其种子在萌发过程中产生选择性异源蛋白质的转化的单子叶植物的方法,和用嵌合可选择标记基因转化细胞的植物。

主权项

1．在选定的诱导条件下用一个或多个能够在单子叶植物种子中能产生异源蛋白质的异源基因转化单子叶植物的方法，包括将一组两个或多个表达盒共转化单子叶愈伤组织细胞，所述的组包括：(a)以5’到3’方向的可操作连接的序列的，可选择性标记物表达盒具有(ⅰ)转录调节区，它在转化的愈伤组织细胞中以比在所说的选定的靶组织中显著高的水平表达，并且在高严谨条件下与水稻β-葡聚酶基因操纵子杂交，所说的操作子由SEQ ID NO:1所识别；(ⅱ)一个选择性标记基因，和(ⅲ)一个3’未翻译的终止子区域；和(b)至少一个异源基因表达盒，在序列中以5’到3’方向可操作连接的所说的异源基因表达盒具有(ⅰ)转录调节区，它在植物种子中被表达，诱导或可诱导的，(ⅱ)编码选定的异源蛋白质的第一DNA序列，和(ⅲ)一个3’未翻译的终止子区域；在有效地阻止在没有可选择性标记物基因表达的条件下愈伤组织细胞生长的选择剂的存在下培养愈伤组织；根据其在选择剂存在下的生长情况证明，选择表达可选择标记物的那些愈伤组织细胞；和在非选择性条件下将选定的愈伤组织细胞再生为转基因植物。