直接从黄牛肺中制取高纯度抑肽酶的方法

摘要

一种直接从黄牛肺中制取高纯度抑肽酶的方法，它是将专利申请号为９６１２０６４６．２的化学改性和修饰的壳多糖类活性载体与胰蛋白酶偶联制成壳多糖类固定化胰蛋白酶亲和吸附剂，然后对牛肺进行静态吸附和动态洗脱，制得的抑肽酶其比活力高达５０００kiu/mg以上比药典所规定的比活力３６００kiu/mg高得多。$＃!

主权项

1．一种直接从黄牛肺中制取高纯度抑肽酶的方法，其特征在于：(1)亲和吸附剂的合成：将中国专利申请号为96120646.2的化学改性和修饰的壳多糖活性载体放入PH8.0的硼酸缓冲液内，加入胰蛋白酶，在搅拌下于4-6℃反应20小时过滤，固体物用0.5摩/升氯化钠溶液洗涤和用PH1.5盐酸洗涤，再用水洗涤过滤，固体物放入PH7.8-8.0的硼砂缓冲液制得壳多糖类固定化胰蛋白酶亲和吸附剂；(2)从牛肺制备抑肽酶：将牛肺绞碎，加水用2N硫酸调至PH=1.5，过滤，滤液于80℃下加热，加入活性炭，脱色过滤，滤液用10％氢氧化钠调至PH=8.0，静置，离心，取上清液，加入(1)制成的亲和吸附剂进行静态吸附，然后，装入层析柱中用PH8.0的硼砂氯化钙平衡液平衡，用1摩/升氯化钾，0.5摩/升醋酸钠和0.5摩/升醋酸(PH1.5)洗脱，收集PH=2的洗脱液，经超滤后于-20℃下冻干而成。