摘要 |
SE PRESENTA UN METODO ENZIMATICO EN DOS ETAPAS, PARA LA DETECCION DE BACTERIAS COLIFORMES, O DE E. COLI, EN EL QUE LAS BACTERIAS SE CONCENTRAN SOBRE UN FILTRO DE MEMBRANA. DICHO FILTRO SE SITUA SOBRE UN MEDIO DE CULTIVO QU CONTIENE NUTRIENTES, INCLUYENDO PREFERIBLEMENTE MINERALES, UN HIDROLIZADO PROTEICO Y UN AZUCAR, PREFERIBLEMENTE MALTOSA O UN POLIALCOHOL, PREFERIBLEMENTE MANITOL, UN INDUCTOR DE UNA ENZIMA MARCADORA, ESPECIALMENTE {BE}-GALACTOSIDASA O {BE}-GLUCURONIDASA, E INHIBIDORES DEL CRECIMIENTO DE BACTERIAS COMPETIDORAS. TRAS UNA FASE DE PREINCUBACION, EL FILTRO SE SITUA SOBRE UN MEDIO DE CRECIMIENTO, QUE CONTIENE UN SUSTRATO ENZIMATICO FLUOROGENICO O QUIMIOLUMINOGENICO, Y UN PERMEABILIZADOR DE MEMBRANA. EL FILTRO DE MEMBRANA Y EL MEDIO DE ENSAYO, SE INCUBAN PARA PERMITIR LA ESCISION DEL SUSTRATO ENZIMATICO, PRODUCIENDO COLONIAS FLUORESCENTES O QUIMIOLUMINISCENTES SOBRE EL FILTRO DE MEMBRANA, TRAS EL LANZAMIENTO DE LA EMISION LUMINOSA.
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