血小板生成素制备工艺

摘要

本发明是从男性尿中经过滤、纤维素层析、盐析、透析、凝胶过滤、纤维素层析、超滤膜超滤、速冻干燥获得的血小板生成素（ＴＰＯ）产品。经动物试验模型及人体临床观察，现对血小板减少性紫癜、骨髓增生异常综合症、再生障碍性贫血及放疗、化疗、骨髓移植及药物引起的血小板减少症均获得满意的疗效，且未发现明显毒副作用。产品的原料充足，生产工艺简单，成本低，为其最大特点。$＃!

主权项

1．一种血小板生成素制备工艺，其特征是以无细菌污染的男性新鲜尿为原料通过下列步骤制备：a．过滤：将尿液经微孔滤膜、砂芯或石棉滤器过滤，b．层析：将过滤过的尿液按体积1∶1加蒸馏水稀释后通过离子交换纤维素柱进行层析，分别用0．1和0．15摩尔浓度氯化钠的0．01摩尔浓度磷酸的缓冲液洗脱，弃去峰1和峰2洗脱物，然后用0．35摩尔浓度氯化钠的磷酸缓冲液洗脱，收集峰3洗脱液，c．盐析：将步骤b中所收集的峰3洗脱液加入硫酸铵至50-80％饱和度，放冷过液，在4-10℃离心收集沉淀物，d．透析：将沉淀物加蒸馏水溶解，用透析袋对水透析至无硫酸根，e．凝胶过滤：将透析物通过生物胶过滤柱或交联葡聚糖凝胶过滤柱分离，用0．01摩尔浓度磷酸缓冲液平衡上样，洗脱，收集峰Ⅲ洗脱液，f．纤维素层析：将峰Ⅲ洗脱液经纤维素层析，用0．01摩尔浓度磷酸缓冲液进行洗脱，并收集洗脱液，g．超滤膜超滤：将步骤f收集的洗脱液用截止分子量在3-5万的超滤膜进行超滤，h．最后进行速冻干燥即得血小板生成素。