发明名称 磺胺二甲氧嘧啶之单株抗体及检测磺胺二甲氧嘧啶含量之套组以及同时检测磺胺二甲嘧啶或(及)磺胺二甲氧嘧啶含量之套组
摘要 本发明提供专一于磺胺二甲氧嘧啶(Sulfadimethoxine)的单株抗体,亦提供用此抗体检测磺胺二甲氧嘧啶含量之套组及方法,以供检测磺胺二甲氧嘧啶残留之用。及利用此抗体与另一株专一于磺胺二甲嘧啶(Sulfamethazine)的单株抗体搭配,以提供可同时检测磺胺二甲氧嘧啶或(及)磺胺二甲嘧啶含量之套组及方法,以供检测磺胺二甲氧嘧啶或(及)磺胺二甲嘧啶残留之用。
申请公布号 TW424109 申请公布日期 2001.03.01
申请号 TW086117724 申请日期 1997.11.25
申请人 财团法人生物技术开发中心 发明人 刘涓;温国兰;锺嫈嫈;戴永德;林秋月;杨保华;张东玄
分类号 C12N5/20;G01N33/577 主分类号 C12N5/20
代理机构 代理人 洪澄文 台北巿信义路四段二七九号三楼
主权项 1.一种融合瘤2806-31.5,其可产生对抗磺胺二甲氧啮 啶之单株抗体。2.根据申请专利范围第1项之融合 瘤,其系骨髓瘤细胞与产生对抗磺胺二甲氧嘧啶之 单株抗体之B细胞融合之细胞株。3.根据申请专利 范围第2项之融合瘤,其中该B细胞系选自以磺胺二 甲氧嘧啶衍生物与载体蛋白质结合物免疫之动物 。4.根据申请专利范围第3项之融合瘤,其中该磺胺 二甲氧嘧啶衍生物具有以下之通式:5.根据申请专 利范围第4项之融合瘤,其中该磺胺二甲氧嘧啶衍 生物系4-氢氧基[(磺胺二甲氧嘧啶)-偶氮]-1-苯基乙 酸-氮代氢氧基环丁亚醯酯。6.根据申请专利范围 第3项之融合瘤,其中该载体蛋白质系选自于白蛋 白、球蛋白、血蓝质及铁蛋白质所构成的族群之 一。7.根据申请专利范围第5项之融合瘤,可分泌制 造出对抗磺胺二甲氧嘧啶之单株抗体之轻链可变 区多胜。8.根据申请专利范围第5项之融合瘤,可 分泌制造出对抗磺胺二甲氧嘧啶之单株抗体之重 链可变区多胜。9.根据申请专利范围第5项之融 合瘤,可分泌制造出包含有对于磺胺二甲氧嘧啶具 有专一性之轻链可变区多胜及重链可变区多胜 之单株抗体。10.一种检测磺胺二甲氧嘧啶含量 之方法,其包括下列步骤: 提供一种由融合瘤2806-31.5所分泌产生之对于磺胺 二甲氧嘧啶具有专一性之单株抗体; 提供一讯号产生之工具,其能操作性地与磺胺二甲 氧嘧啶结合而产生讯号; 使单株抗体粘附在支持工具上形成抗体-支持物共 轭体;以及 使检测样品或磺胺二甲氧嘧啶标准液与对抗磺胺 二甲氧嘧啶讯号结合物竞争,并与抗体-支持共轭 体结合,并测量由讯号产生工具所产生之讯号。11. 根据申请专利范围第10项之方法,其中该讯号产生 之工具是选自放射性免疫测试、萤光免疫测试、 冷光标记物以及酵素所构成的族群之一。12.根据 申请专利范围第11项之方法,其中该冷光标记物是 选自生物冷光标记物及化学冷光标记物所构成的 族群之一。13.根据申请专利范围第11项之方法,其 中该酵素是选自于过氧化氢酵素、硷性磷酯酸酵 素以及-半乳糖酸酵素所构成的族群之一。14. 根据申请专利范围第10项之方法,其中与讯号结合 之磺胺二甲氧嘧啶之磺胺二甲氧嘧啶衍生物之通 式如下:15.根据申请专利范围第10项之方法,其中该 磺胺二甲氧嘧啶衍生物为磺胺二甲氧嘧啶-琥珀酸 联胺。16.根据申请专利范围第10项之方法,其中该 支持物之工具包括微量测试盘、微球体以及选自 于聚乙烯、聚苯乙烯、硝化纤维、耐龙等适宜的 蛋白质固定材料所构成的族群之一。17.根据申请 专利范围第10项之方法,其中该融合瘤细胞是由鼠 骨髓细胞-FO细胞株及对抗磺胺二甲氧嘧啶衍生物- 4-氢氧基[(磺胺二甲氧嘧啶)-偶氮]-1-苯基乙酸-氮 代氢氧基环丁亚醯酯-牛血清白蛋白的鼠类B细胞 株所融合的。18.根据申请专利范围第17项之方法, 其中筛选该融合瘤之载体蛋白系选自于白蛋白、 球蛋白、血蓝质及铁蛋白质所构成的族群之一。 19.根据申请专利范围第17项之方法,其中系使用聚 乙二醇进行细胞融合。20.一种套组,其包括融合瘤 2806-31.5所产生之对于磺胺二甲氧嘧啶具有专一性 之单株抗体。21.根据申请专利范围第20项之套组, 其为直接竞争型酵素结合免疫分析法套组。22.根 据申请专利范围第21项之套组,其中包括有: (1)固相支持物;(2)对于磺胺二甲氧嘧啶具有专一性 之单株抗体;(3)磺胺二甲氧嘧啶之标准品;(4)磺胺 二甲氧嘧啶-讯号复合物;以及(5)呈色物质。23.根 据申请专利范围第22项之套组,其中该固相支持物 包括微量测试盘、微球体以及选自于聚乙烯、聚 苯乙烯、硝化纤维、耐龙等适宜的蛋白质固定材 料所构成的族群之一。24.根据申请专利范围第22 项之套组,其中该呈色物质是选自放射性免疫测试 、萤光免疫测试、冷光标记物以及酵素所构成的 族群之一。25.根据申请专利范围第24项之套组,其 中该冷光标记物是选自生物冷光标记物及化学冷 光标记物所构成的族群之一。26.根据申请专利范 围第24项之套组,其中该酵素是选自于过氧化氢酵 素、硷性磷酯酸酵素以及-半乳糖酸酵素所构 成的族群之一。27.一种检测磺胺二甲氧嘧啶或(及 )含量之方法,其包括下列步骤: (a)提供一种由融合瘤2410-7.24所分泌之对于磺胺二 甲嘧啶具有专一性之单株抗体,或(及)一种由融合 瘤2806-31.5所分泌之对于磺胺二甲氧嘧啶具有专一 性之单株抗体; (b)提供一讯号产生之工具,其能操作性地与磺胺二 甲嘧啶结合而产生讯号,及提供一讯号产生之工具 ,其能操作性地与磺胺二甲氧嘧啶结合而产生讯号 ; (c)使该单株抗体粘附在一支持工具上,形成抗体- 支持物共轭体;以及 使样品或磺胺二甲嘧啶标准液与磺胺二甲嘧啶讯 号结合物竞争,并与抗体-支持共轭体结合,并测量 由讯号产生工具所产生之讯号,以及使样品或磺胺 二甲氧嘧啶标准液与磺胺二甲氧嘧啶讯号结合物 竞争,并与抗体-支持共轭体结合,并测量由讯号产 生工具所产生之讯号。28.根据申请专利范围第27 项之检测方法,其中该讯号产生之工具是选自放射 性免疫测试、萤光免疫测试、冷光标记物以及酵 素所构成的族群之一。29.根据申请专利范围第28 项之检测方法,其中该冷光标记物是选自生物冷光 标记物及化学冷光标记物所构成的族群之一。30. 根据申请专利范围第28项之检测方法,其中该酵素 是选自于过氧化氢酵素、硷性磷酯酸酵素以及- 半乳糖酸酵素所构成的族群之一。31.根据申请 专利范围第27项之检测方法,其中与讯号结合之磺 胺二甲嘧啶之磺胺二甲嘧啶衍生物之通式如下:32. 根据申请专利范围第27项之检测方法,其中与讯号 结合之磺胺二甲氧嘧啶之磺胺二甲氧嘧啶衍生物 之通式如下:33.根据申请专利范围第27项之检测方 法,其中该支持物之工具包括微量测试盘、微球体 以及选自于聚乙烯、聚苯乙烯、硝化纤维、耐龙 等适宜的蛋白质固定材料所构成的族群之一。图 式简单说明: 第一图为磺胺二甲氧嘧啶于磺胺二甲氧嘧啶直接 竞争型ELISA之标准抑制曲线。 第二图为磺胺二甲氧嘧啶以HPLC测试与以磺胺二甲 氧嘧啶竞争型ELISA之测试结果之相关曲线。 第三图为磺胺二甲嘧啶于磺胺二甲嘧啶/磺胺二甲 氧嘧啶双用直接竞争型ELISA之标准抑制曲线。 第四图为磺胺二甲氧嘧啶于磺胺二甲嘧啶/磺胺二 甲氧嘧啶双用直接竞争型ELISA之标准抑制曲线。 第五图为磺胺二甲嘧啶以HPLC测试与以磺胺二甲嘧 啶/磺胺二甲氧嘧啶双用竞争型ELISA之测试结果之 相关曲线。 第六图为磺胺二甲氧嘧啶以HPLC测试与以磺胺二甲 嘧啶/磺胺二甲氧嘧啶双用竞争型ELISA之测试结果 之相关曲线。
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