发明名称 抗大麻代谢物之单株抗体,产生该抗体之融合瘤及其于检测大麻滥用之用途
摘要 本发明提供对大麻之主要代谢物,四氢大麻酚(tetrahydrocannabinol,THC-COOH)及其类似物具有专一性之单株抗体,产生该抗体之融合瘤,及含此单株抗体之套组。此单株抗体可用以侦测大麻之滥用。
申请公布号 TW420717 申请公布日期 2001.02.01
申请号 TW086117447 申请日期 1997.11.21
申请人 财团法人生物技术开发中心 发明人 温国兰;洪甲昌;陈箐璎;戴永德;林秋月;杨保华;刘涓
分类号 C12N5/20;C12P21/08;G01N33/577 主分类号 C12N5/20
代理机构 代理人 陈长文 台北巿敦化北路二○一号七楼
主权项 1.一种融合瘤,其系产生专一于大麻代谢物-9-THC- 羧酸衍生物之抗体,其系鼠源融合瘤细胞株3402-13.9 于一九九七年七月九日寄存于食品工业发展研 究所之菌种保存及研究中心,寄存编号CCRC960065。2. 根据申请专利范围第1项之融合瘤,其中该-9-THC- 羧酸衍生物具有以下通式 其中: R表 X=O或N; n=2-4;且 且m=1-3。3.根据申请专利范围第2项之融合瘤,其中 该-9-THC-羧酸衍生物系6-9-THC-COO-氮代氢氧基环丁 二亚醯胺。4.一种抗-9-THC-羟酸之单株抗体,其系 由根据申请专利范围第1项之融合瘤所制造。5.根 据申请专利范围第1项之单株抗体,其可用于检测 大麻及其代谢物。6.一种检测疑含大麻样品中大 麻含量之方法,其包括下列步骤: (a)提供一由融合瘤3402-13.9所分泌之抗-9-THC-羧酸 单株抗体: (b)提供一讯号产生之物质,其能操作性地与抗-9- 叮IC-羧酸抗体结合而产生讯号; (c)使-9-THC-羟酸抗原粘附在支撑物质上形成抗原 一支撑物质共轭体; (d)使样品或-9-THC-羧酸标准液与抗原一支撑物质 竞争并与抗-9-THC-羧酸单株抗体-讯号结合体共 轭结合,并测量由讯号产生之物质所产生之讯号。 7.根据申请专利范围第6项之方法,其中该-9-THC- 羧酸衍生物一抗原之结合体具有如下通式之-9- THC-羧酸衍生物: 其中: R表 X=O或N; n=2-4;且 且m=1-3。8.根据申请专利范围第7项之方法,其中该 -9-THC-羧酸衍生物系-9-THC-COO-氮代氢氧基环丁 二亚醯胺。9.根据申请专利范围第6项之方法,其中 用以筛选该融合瘤之载体蛋白质系选自白蛋白、 球蛋白、血蓝质、铁蛋白质。10.根据申请专利范 围第6项之方法,其中用以制备该融合瘤之骨髓瘤 细胞为鼠骨髓瘤细胞FO细胞株,B细胞株系得由以大 麻衍生物系-9-THC-COO-氮代氢氧基环丁二亚醯胺- 牛血清白蛋白免疫之鼠。11.一种用于检测大麻及 其代谢物之套组,其包括根据申请专利范围第4项 之单株抗体。12.根据申请专利范围第11项之套组, 其为直接竞争型ELISA套组。13.根据申请专利范围 第12项之套组,其包括(1)固相支撑物质,(2)根据申请 专利范围第4项之抗-9-THC-羧酸单株抗体一讯号 复合物,(3)-9-THC-羧酸标准品,(4)-9-THC-羧酸衍生 物-抗原结合体,及(5)呈色物质。14.根据申请专利 范围第13项之套组,其中该固相支撑物质为微滴盘 、微球体或纸。15.根据申请专利范围第13项之套 组,其中该讯号选自萤光物、冷光标记物、放射性 元素及酵素。16.根据申请专利范围第15项之套组, 其中该酵素选自过氧化氢酵素、硷性磷酸酯酵素 、-半乳糖酵素。17.根据申请专利范围第11项之 套组,其系层析式免疫检验片。18.根据申请专利范 围第17项之套组,其包括(1)样品接触区,(2)根据申请 专利范围第4项之单株抗体-指示剂区,(3)反应测试 区,及(4)液体回收区。19.根据申请专利范围第17项 之套组,其中该检验片由可提供毛细胞现象并吸附 液体之材质之多孔性载体物质所构成。20.根据申 请专利范围第19项之套组,其中该检验片选自滤纸 、硝化纤维膜、耐龙膜、玻璃纤维膜。21.根据申 请专利范围第18项之套组,其中该指示剂选自有色 乳胶颗粒、金属胶质溶液、非金属胶溶液及染料 胶质溶液。22.根据申请专利范围第21项之套组,其 中该有色乳胶颗粒系选自聚苯乙烯、聚乙烯甲苯 、聚苯乙烯-丙烯酸及聚丙烯的聚合物。23.根据 申请专利范围第21项之套组,其中该金属胶质溶液 系金胶质溶液。24.根据申请专利范围第21项之套 组,其中该非金属胶质溶液系矽胶溶液。25.根据申 请专利范围第18项之套组,其中该反应测试区含大 麻代谢物-9-THC-羟酸衍生物-载体抗原结合体。26 .根据申请专利范围第25项之套组,其中该载体抗原 为白蛋白、球蛋白、血蓝质、铁蛋白质。27.一种 侦测尿液中大麻及其代谢物-9-THC-羧酸之方法, 该方法系利用根据申请专利范围第8项之单株抗体 或根据申请专利范围第11-26项中任一项之套组检 测尿液。图式简单说明: 第一图为大麻直接竞争型ELISA之标准抑制曲线。 第二图为大麻简易层析免疫测试片于不同浓度大 麻之测试结果。
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