组建重组腺病毒伴随病毒包装系统的自主复制载体及应用

摘要

能用于组建腺病毒伴随病毒包装系统的自主复制型载体，它是由腺病毒伴随病毒基因组编码所有病毒蛋白基因的１９１—４４８４核苷酸序列元件、ＥＢ病毒质粒型复制子及其反式作用因子、真核细胞抗性选择标志、和带大肠杆菌复制子和氨苄青霉素抗性基因的大肠杆菌质粒骨架所组成。可作为助手包装质粒转染人细胞表达ＡＡＶ基因组编码的蛋白以提供反式功能用于包装携带外源基因的ＡＡＶ病毒颗粒；也可以首先转染进入细胞系，经抗性筛选构建ＡＡＶ基因组以多拷贝附加子形式稳定存在并自主复制的ＡＡＶ反式包装细胞系，用于生产重组ＡＡＶ病毒颗粒。$#!

主权项

1，能用于组建腺病毒伴随病毒(Adeno-associated virus，AAV)包装系统的自主复制型载体，其特征在于由下列DNA元件组成： (1)AAV基因组191-4484核苷酸； (2) EB病毒质粒型复制子OriP及其反式作用因子EBNA-Ⅰ： (3)潮霉素B磷酸转移酶基因 (4)包括大肠杆菌复制子和氨苄青霉素抗性β内酰胺酶基因的大肠杆菌质粒骨架。