溶菌酶亲和层析凝胶介质的制备方法

摘要

溶菌酶亲和层析介质的制备方法。将壳聚糖溶于醋酸或盐酸溶液中,再加入3—6倍体积的甲醇,过滤,于滤液中加入脂肪酸酐让其酰化成凝胶状,捣碎凝胶并用水将其洗至中性,用5—10%的NaOH或KOH溶液处理以脱去非N－位的脂肪酰化,再用水洗至中性,在酸性条件下用亚硝酸盐氧化除去凝胶内未酰化的游离氨基,而后用碱调至中性,用水洗去酸和盐类等残留物抽干即得所需的介质。

主权项

1、一种溶菌酶亲和层析介质的制备方法：其特征在于将壳聚糖溶于醋酸或盐酸溶液中，而后加入3～6倍体积的甲醇，搅匀后，过滤，取滤液，在滤液中加入脂肪酸酐，加入量为：壳聚糖质量／脂肪酸酐体积=1／15～25，放置让其凝胶化；将凝胶破碎，用水洗涤凝胶颗粒至中性，而后将其悬浮于5～10％的NaOH或KOH溶液中，在40℃以上保温，以除去凝胶颗粒中非N—位的脂肪酰化，并用水将凝胶颗粒洗至中性，再用醋酸或盐酸水溶液悬浮凝胶颗粒，徐徐加入NaNO2或KNO2溶液并不断搅拌，以氧化脱去凝胶内未酰化的的游离氨基，用碱调悬浮液pH至中性，用水洗涤除去凝胶颗粒中残留的酸和盐类等物质，抽干即得溶菌酶亲和层析介质。