| 主权项 |
1.一种抗人类间白素-8(IL-8)之小鼠单株抗体之轻链 (L链)可变区(V区),其具有序列26所示之下列胺基酸 序列:2.一种抗人类IL-8之小鼠单株抗体重链(H链)V 区,其具有序列27所示之下列胺基酸序列:3.一种嵌 合抗体L链,其特征为含有人类抗体L链固定区(C区) 及抗人类IL-8之小鼠单株抗体L链V区,所成之嵌合抗 体L链中,前述小鼠L链V区为序列26所示之下列胺基 酸序列:4.一种嵌合抗体H链,其特征为含有人类抗 体H链C区及抗人类IL-8之小鼠单株抗体H链V区,所成 之嵌合抗体H链中,前述小鼠H链V区为序列27所示之 下列胺基酸序列:5.一种嵌合抗体,其特征为含有: (1)含有人类抗体L链固定区(C区)及抗人类IL-8之小 鼠单株抗体L链V区,所成L链;以及 (2)含有人类抗体H链C区及抗人类IL-8之小鼠单株抗 体之H链V区,所成H链; 所成之嵌合抗体中,前述小鼠L链V区含有序列26所 示之下列胺基酸序列: 且前述小鼠H链V区具有序列27所述之下列胺基酸序 列:6.一种抗人类IL-8之小鼠单株抗体L链V区之互补 性决定区(CDR),其为具有以下所示之胺基酸序:7.一 种抗人类IL-8之小鼠单株抗体H链V区之CDR,其为具有 以下所示之胺基酸序列:8.一种抗人类IL-8抗体之重 建人类抗体L链V区,其特征为含有(1)人类抗体L链V 区之框架构造区(FR),及(2)对于抗人类IL-8之小鼠单 株抗体L链V区之CDR所成,对人类IL-8的抗体之重建( veshaped)人类抗体L链V区而言,其中前述CDR具有下列 胺基酸序列: 且前述FR为来自人类抗体REI。9.如申请专利范围第 8项之重建人类抗体L链V区,其中该L链V区为具有如 下所示的RVLa之胺基酸序列。10.一种抗人类IL-8抗 体之重建人类抗体H链V区,其特征为含有(1)人类抗 体H链V区之FR,及(2)对人类IL-8之小鼠抗体H链V区之 CDR所成,对人类IL-8的抗体之重建人类抗体H链V区而 言,其中前述CDR为具有下列胺基酸序列: 且前述FR之FR1,2,3为来自人类抗体VDH26.FR4为来自人 类抗体4B4者。11.如申请专利范围第10项之重建人 类抗体H链V区,其中该H链V区为具有如下所示的RVHa, RVHb,RVHc,RVHd,RVHe,RVHf,RVHg或RVHh之胺基酸序列。12.一 种抗人类IL-8之重建人类抗体L链,其特征为含有(1) 人类抗体L链C区,以及(2)含有人类抗体L链FR,及抗人 类IL-8之小鼠单株抗体之L链CDR所成L链V区,所成,其 中该人类抗体L链C区为人类Ck区,人类抗体L链FR为 来自REI,该L链CDR具有下列所示胺基酸序列:13.如申 请专利范围第12项之重建人类抗体L链,其中该L链V 区具有如下所示的RVLa之胺基酸序列。14.一种抗人 类IL-8之重建人类抗体之H链,其特征为含有(1)人类 抗体H链C区,以及(2)含有人类抗体H链FR,及抗人类IL- 8之小鼠单株抗体之H链CDR所成H链V区,所成,其中该 人类抗体H链C区为人类Cr区,该人类抗体H链FR1,2,3为 来自人类抗体VDH26,人类抗体FR4为来自人类抗体4B4, 且该H链CDR具有下述胺基酸序列:15.如申请专利范 围第14项之重建人类抗体H链,其中该H链V区为具有 如下所示的RVHa,RVHb,RVHc,RVHd,RVHe,RVHf,RVHg或RVHh之胺 基酸序列或其一部份。16.一种抗人类IL-8之重建人 类抗体,其特征为含有 (A)含有(1)人类抗体L链C区,及 (2)含人类抗体L链FR,及抗人类IL-8之小鼠单株抗体L 链CDR所成人类抗体L链V区,所成L链;以及 (B)含有(1)人类H链C区,及 (2)含有人类抗体H链FR,及抗人类IL-8之小鼠单株抗 体之H链CDR所成人类H链V区,所成H链; 所成,该L链CDR具有下列所示胺基酸序列, 该H链CDR具有下列所示胺基酸序列:17.如申请专利 范围第16项之重建人类抗体,其中该L链CDR具有下列 示胺基酸序列 该H链CDR具有下列所示胺基酸序列: 该人类抗体L链FR为来自人类抗体RE1;该人类抗体H 链FR1,2,3来自人类抗体VDH26,FR4来自人类抗体4B4,该 人类抗体L链C区为人类Ck区;且该人类抗体H链C区系 人类Cr1区。18.如申请专利范围第16项之重建人类 抗体,其中该L链CDR具有下列之胺基酸序列: 该H链CDR具下列胺基酸序列: 该人类抗体L链FR系来自人类抗体RE1;该人类抗体H 链FR1,2,3来自人类抗体VDH26.FR4来自人类抗体4B4,该 人类抗体L链C区为人类Ck区;且该人类抗体H链C区系 人类Cr4区。19.如申请专利范围第16项之重建人类 抗体,其中该L链V区为具有如下所示的RVLa之胺基酸 序列。20.如申请专利范围第16项之重建人类抗体, 其中该H链V区为具有如下所示的RVLa,RVHb,RVHc,RVHd, RVHe,RVHf,RVHg或RVHh之胺基酸序列。21.一种可编码抗 人类IL-8抗体嵌合抗体L链之DNA;其特征为含(1)人类 抗体L链C区;及(2)抗人类IL-8之小鼠单株抗体L链V区; 所成,其中该L链V区为可编码序列26所示下列胺基 酸序列:22.如申请专利范围第21项之DNA,其中该L链V 区为具有序列26所示核 酸序列:23.一种可编码抗人 类IL-8抗体嵌合抗体H链之DNA;其特征为含(1)人类抗 体H链C区;及(2)抗人类IL-8小鼠单株抗体H链V区;所成 ,其中该H链V区为可编码序列27所示下列胺基酸序 列:24.如申请专利范围第23项之DNA,其中该H链V区为 具有序列27所示核 酸序列:25.一种可编码抗人类IL- 8之小鼠单株抗体L链V区的DNA,其中该L链V区为具有 序列26所示下列胺基酸序列:26.如申请专利范围第 25项之DNA,其中编码该L链V区之DNA具有序列26所示下 列核酸序列:27.一种可编码抗人类IL-8之小鼠单 株抗体H链V区的DNA,其中该H链V区为具有序列27所示 胺基酸序列:28.如申请专利范围第27项之DNA,其中编 码该H链V区之DNA具有序列27所示下列核酸序列:29 .一种可编码抗人类IL-8之小鼠单株抗体L链V区之CDR 的DNA,其中CDR为可编码下列所示胺基酸序列:30.如 申请专利范围第29项之可编码CDR之DNA,其中该CDR为 具有下列所示核酸序列:31.一种可编码抗人类IL- 8之小鼠单株抗体H链V区之CDR的DNA,其中CDR为可编码 下列所示胺基酸序列:32.如申请专利范围第31项之 可编码CDR之DNA,其中该CDR为具有下列所示核酸序 列:33.一种可编码抗人类IL-8抗体之重建人类抗体L 链V区的DNA,其特征为含有 (1)人类抗体L链V区之FR,及 (2)抗人类IL-8小鼠单株抗体L链V区之CDR,所成,其中 上述CDR为具有下列所示胺基酸序列: 且该FR系来自人类抗体REI。34.如申请专利范围第33 项之DNA,其中该L链V区为具有如下所示的RVLa之胺基 酸序列。35.如申请专利范围第33项之DNA,其为具有 序列62或序列65所示下列核酸序列: (序列号码:62) (序列号码:65)36.一种可编码抗人类IL-8抗体之重建 人类抗体H链V区的DNA,其特征为含有 (1)人类抗体H链V区之FR,及 (2)抗人类IL-8小鼠单株抗体H链V区之CDR,所成,其中 上述CDR为具有下列所示胺基酸序列: 其中该FR1,2,3为来自人类抗体VDH26.FR4为来自人类抗 体4B4。37.如申请专利范围第36项之可编码重建人 类抗体H链V区之DNA,其中该H链V区可编码如下所示 的为RVHa,RVHb,RVHc, RVHd, RVHe,RVHf,RVHg或RVHh之胺基酸序 列。38.如申请专利范围第36项之DNA,其为具有序列 38,41,44,45,48,51,54或55所示下列核酸序列: (序列号码:38) (序列号码:41) (序列号码:44) (序列号码:45) (序列号码:48) (序列号码:51) (序列号码:54) (序列号码:55)39.一种可编码抗人类IL-8抗体之重建 人类抗体L链的DNA,其特征含有 (1)人类抗体L链C区;以及 (2)含有人类FR,及抗人类IL-8之小鼠单株抗体的CDR所 成L链C区; 所成,其中该L链V区可编码如下所示的RVLa之胺基酸 序列。40.如申请专利范围第39项之DNA,其中该L链C 区具有序列62或序列65所示核酸序列: (序列号码:62) (序列号码:65)41.如申请专利范围第39或40项之DNA,其 中该人类抗体L链C区为人类抗体L链Ck区。42.一种 可编码抗人类IL-8抗体之重建人类抗体H链的DNA,其 特征含有: (1)人类H链C区;以及 (2)含有人类FR,及抗人类IL-8之小鼠单株抗体的CDR所 成H链V区; 所成,其中该H链V区可编码如下所示的RVHa,RVHb,RVHc, RVHd,RVHe,RVHf,RVHg或RVHh之胺基酸序列。43.如申请专 利范围第42项之DNA,其中H链V区为具有序列38,41,44,45 ,48,51,54或55所示下列核 酸序列: (序列号码:38) (序列号码:41) (序列号码:44) (序列号码:45) (序列号码:48) (序列号码:51) (序列号码:54) (序列号码:55)44.如申请专利范围第42或43项之DNA,其 中该人类抗体H链C区为人类抗体H链Cr1区。45.如申 请专利范围第42或第43项之DNA,其中该人类抗体H链C 区为人类抗体H链Cr4区。46.一种抗人类IL-8之重建 人类抗体的制造方法,其特征为藉由含有如申请专 利范围第39.40.41项中任一项之DNA所成表现载体(HEF- RVLa-gk),及藉由含有如申请专利范围第42.43.44或45项 中任一项之DNA所成表现载体(HEF-RVHa-gr1,HEF-RVHb-gr1, HEF-RVHc-gr1, HEF-RVHd-gr1,HEF-RVHe-gr1,HEF-RVHf-gr1,HEF-RVHg-gr1),同时转 形COS宿主细胞或CHO宿主细胞,经培养该转形之宿主 细胞以回收目的抗体之步骤所成。47.一种抗人类 IL-8之重建人类抗体的制造方法,其特征为藉由含 有如申请专利范围第39.40或41项之DNA,及藉由含有 如申请专利范围第42.43.44或45项之DNA所成单一表现 载体,在该单一表现载体插入H链,L链,使用至少dhfr 作为选择标记,以HCMV启动子之控制来表现之表现 载体,同时转形CHO宿主细胞,经培养该转形之宿主 细胞以回收目的抗体之步骤所成。48.一种抗人类 IL-8之重建人类抗体的制造方法,其特征为藉由含 有如申请专利范围第9项的RVLa及如申请专利范围 第11项的RVHg之DNA所成表现载体,同时转形CHO宿主细 胞,经培养该转形之CHO宿主细胞,以回收目的抗体 之步骤所成。49.一种抗人类IL-8之重建人类抗体的 制造方法,其特征为藉由含有如申请专利范围第9 项的RVLa及如申请专利范围第11项的RVHg之DNA所成表 现载体(HCMV-hWS4-r1a),同时转形CHO宿主细胞,经培养 该转形之宿主细胞,以回收目的抗体之步骤所成。 图式简单说明: 第一图系分别表示表现L链及H链时极有用之含有 人类延伸因子-1(H1-)启动子/增强子的表现质 体HEF-VL-gk及HEF-VH-gr1。 第二图系为确认COS细胞培养上澄液中所产生本发 明嵌合WS-4抗体(chL/chH)对人类IL-8之结合活性,以以 ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)结果表示之图。 第三图系表示为确立可编码本发明重建人类WS-4抗 体H链V区之第一版本「a)(RVHa),及重建人类WS-4抗体L 链V区第一版本「a」 (RVLa)的各胺基酸序列之DNA所 用线图。 第四图系将本发明之重建人类WS-4抗体L链V区(RVLa) 以及H链V区(RVHa)分别表现于嵌合WS-4抗体H链V区(chH) 以及嵌合WS-4抗体L链V区(chL)与COS细胞,与COS细胞培 养上澄液中所产生本发明之嵌合WS-4抗体(chL/chH)比 较对人类IL-8之结合活性与产生量,以ELISA结果表示 之图。 第五图系以ELISA之结果表示,比较COS细胞之培养上 澄液中所生产本发明嵌合WS-4抗体(chL/chH),与COS细 胞培养上澄液中所产生含本发明RVLa所成八种重建 人类WS-4抗体(RVLa/RVHa,RVLa/RVHb,RVLa/RVHc,RVLa/RVHd,RVLa/ RVHe,RVLa/RVHf,RVLa/RVHg,RVLa/RVHh)对人类IL-8结合活性与 产量图。 第六图系以ELISA之结果表示,比较COS细胞之培养上 澄液中所生产本发明嵌合WS-4抗体(chL/chH),与COS细 胞培养上澄液中所产生含本发明RVLb所成八种重建 人类WS-4抗体(RVLb/RVHa,RVLb/RVHb,RVLb/RVHc,RVLb/RVHd,RVLb/ RVHe,RVLb/RVHf,RVLb/RVHg,RVLb/RVHh)对人类IL-8结合活性与 产量图。 第七图系以ELISA之结果表示,比较精制之本发明嵌 合WS-4抗体(chL/chH)与精制之本发明重建人类WS-4抗 体RVLa/RVHg以及RVLb/RVHg对人类IL-8之结合活性图。 |
