PROCEDIMIENTO PARA LA PREPARACION DE UNA PROTEINA MEDIANTE UN HONGO TRANSFORMADO POR INTEGRACION MULTICOPIA DE UN VECTOR DE EXPRESION.

摘要

SE DESCRIBE UN PROCEDIMIENTO PARA PREPARAR UNA PROTEINA MEDIANTE UNA EUCARIOTA TRANSFORMADA MEDIANTE INTEGRACION DE MULTIPLES COPIAS DE UN VECTOR DE EXPRESION EN EL GENOMA DE UNA LEVADURA, COMO SACCHAROMYCES, HANSENULA Y KLUYVEROMYCES, O DE UN MOLDE COMO ASPERGILLUS, RHIZOPUS Y TRICHODERMA, DICHO VECTOR DE EXPRESION CONTENIENDO TANTO UN "GEN EXPRESABLE" QUE CODIFICA DICHA PROTEINA COMO UN LLAMADO "MARCADOR DE SELECCION DEFICIENTE NECESARIO PARA LE CRECIMIENTO DE LA LEVADURA O MOLDE EN UN MEDIO ESPECIFICO", COMO EL GEN LEU2D, TRP1D O URA3D, EN COMBINACION CON UNA SECUENCIA DEL ADN RIBOSOMAL, DANDO COMO RESULTADO UNA INTEGRACION DE COPIA ELEVADA ESTABLE DE 100-300 COPIAS POR CELULA. ESTA INTEGRACION DE MULTIPLES COPIAS DA COMO RESULTADO UN AUMENTO DE PRODUCCION DE LA PROTEINA DESEADA, QUE PUEDE SER A-GALACTOSIDASA DE GUAR, UNA OXIDASA O UNA ENZIMA HIDROLITICA COMO UNA LIPASA.